Разное

Куколки из: Куколки из ткани и трикотажа. Мастер-классы и выкройки | Гриднева Елена Николаевна

Содержание

куклы из дерева, соломы, ниток, ловушки снов, желанницы.

Узнайте, как наши предки защищались от Лиха или Трясовиц, привлекали удачу и поддерживали здоровье. Русское слово «кукла» произошло от греческого «киклос» («круг»). Таким названием обозначали некий сверток или пучок соломы, который девочки любили пеленать и качать, проявляя материнский инстинкт.

Занимательные факты:
Мастерство создания кукол уходит корнями в глубокую древность. Куклам, найденным в могилах египтян, около четырех тысяч лет. Египтянки мастерили фигурки бога Осириса из глины и умели создавать человекоподобные фигуры из воска или дерева. Они имели подвижные суставы и прически из натуральных волос. Историки называют одной из первых обладательниц коллекции авторских кукол Клеопатру. Во дворце куклы исполняли роль манекенов, по их облачениям царица заказывала себе торжественные наряды.
Во Франции XVII века кукол одевали по последней моде, они считались стильным подарком и образцом новомодных тенденций.

В языческой Руси вырезали божков из дерева, создавали тряпичные и соломенные куклы-обереги. Они были важной частью жизни славян. Им поклонялись и использовали как средства защиты от негатива. Спустя время рукотворные персонажи начали украшать быт, радовали глаз и занимали ребят.

Первоочередная задача славянской народной куклы — привлечение желаемого для конкретного человека или семьи. Она использовалась в магических ритуалах и как участница в самых значимых событиях в жизни, а также для праздников. Так, для молодоженов делались «неразлучники» — две куклы из одного куска ткани с общей рукой. А с куклой «кувадкой» муж имитировал процесс родов, чтобы защитить новорожденного от темных сил. При создании кукол брались исключительно натуральные материалы, заготовленные в хорошем настроении.

Занимательный факт:
Первоначально изготовление оберегов было исключительно женской прерогативой. Мужчины в этот момент не должны были присутствовать даже где-то поблизости. Считалось, что только хранительница очага способна сделать по-настоящему сильный оберег и вложить в него частицу живой энергии. По умелости в создании первой куклы определяли готовность девушки к замужеству.

Славянские куклы из дерева

Куклы-берегини вырезались мужчинами для любимых женщин из сломанных ветром веток священных деревьев. На миниатюрную деревянную фигурку наносилась спираль зарождения жизни и символы женского плодородия. Такую куклу муж клал в льняную ладанку, которую женщина носила на поясе, чтобы в роду были здоровые дети.

Славянские куклы из соломы

Народные куклы «Конь-Огонь» из талаша и лыка. Фото: А. Степанов / Фотобанк Лори

Кукла-шестиручка из соломы

Из соломы чаще всего делали духов-обереговиков и животных. Леший, домовой или водяной тщательно украшались и использовались как обрядовые куклы на славянских праздниках. Они помогали решать семейные проблемы, возвращали здоровье с помощью переклада болезней на фигурку и ее дальнейшего сожжения.

Читайте также:

Чтобы успевать по хозяйству, женщины делали из соломы кукол-шестиручек. В процессе их создания непременно приговаривали: «Делаю тебя, чтобы во всех делах успевать и делать их хорошо. Эту ручку верчу, чтобы в доме моем всегда были порядок, мир и уют. Эту ручку верчу, чтобы муж всегда был ухожен и всем доволен».

Славянские куклы из ниток

Создание куклы-оберега из ниток

Традиционные русские куклы-обереги из натурального природного материала. Фото: Svet / Фотобанк Лори

Куколки-мотанки из ниток умели делать даже маленькие дети, что, помимо благоприятных магических свойств, способствовало развитию мелкой моторики. Они мотались как оберег в дорогу и служили защитным декором углов дома. На таких берегинь, как на двойника, наматывались беды, невзгоды и болезни хозяина.

Тряпичные куклы-обереги

Чаще всего в Древней Руси изготавливались тряпичные куклы-обереги, служившие владельцам на протяжении всей жизни. Обрядовая, или обережная, кукла считалась мощным талисманом во благо рода.

Куклы-берегини делались без применения иголок и ножниц, чтобы они не могли нанести вред своим хозяевам. Нитки обрывались руками или перекусывались зубами. Даже ткань в старину рвали руками. Когда делали кукле грудь, думали о счастливом материнстве и изобилии. Берегиня создавалась на подоле, то есть на коленях, в личном пространстве женщины, а не на столе, потому что он считался общим местом.

Каждая куколка мастерилась с белым или однотонным лицом, символизирующим чистоту помыслов и одушевление хозяев. В процессе создания приговаривали: «Светлая голова, чистая, наполненная добром и любовью». Славяне никогда не рисовали и не вышивали своим берегиням глаза, рот и нос, чтобы в них не вселились злые духи и не перенеслись злые мысли.

Зерновушка

Процесс создания куклы Зерновушки

Зерновушки. Фото: Г. Марков / Фотобанк Лори

Она имеет несколько названий — Крупеничка, Горошинка, Зернушка или Зерновушка — и считается главной куклой в семье. В процессе создания ее по традиции наполняли зерном гречихи. Из мешочка в ее руках или из нее самой брали первые зерна для предстоящего посева. После окончания уборочной страды мешочек наполняли зерном из нового урожая. Иногда мешочек наполняли и другими крупами: овсом — на силу, перловкой — на сытость, рисом — на праздник. Берегиня приносила достаток в семью и делала жизнь сытой. Ее наряжали и ставили на самое видное место — в красный угол избы рядом с иконами.

Кукла на счастье и удачу

Изготовление куклы «на счастье». Фото: С. Лаврентьев / Фотобанк Лори

Готовая кукла-оберег «на счастье»

Самая юная и обаятельная кукла отличалась от остальных длинной косой, символизирующей долгую и беззаботную жизнь. Причем чем длиннее коса — тем большую защитную силу имеет берегиня. По поверью, в женских волосах заключалась жизненная сила.

Ловушка для снов

Кукла-оберег Путешественница. Автор: Светлана Казина

Куклы-обереги. Ловушка для снов

Охранительницу сновидений изготавливали непременно весной. Такую куколку обвязывали оранжевой ниткой, символизирующей солнечные лучи, а на груди красной ниткой вышивали обережный крест. Кукла «день-ночь» делалась из привязанных друг к другу фигурок из белой и черной ткани. Подвешенная возле кровати, она не только берегла ночной покой, но и заряжала энергией и радостью на предстоящий день.

Желанница

Куклы-обереги. Желанница

Куклы-обереги. Желанница

Наибольшим спросом и в наши дни пользуется кукла, исполняющая заветные желания. Уже в процессе изготовления мастерицы закладывают в нее позитивный настрой и думы о своих мечтах. На Руси сокровенная куколка пряталась от посторонних глаз и хранилась в коробочке. Чтобы исполнилось желание, хозяйка повязывала Желаннице красивую тесьму или пришивала яркую бусинку. Затем подносила куколку к зеркалу и приговаривала: «Полюбуйся на себя красавица. Исполни за подарок мое желание».

Крещение и похороны кукушки в д. Черный Поток Людиновского района Калужской области.
Две ольховые палочки с раздвоенным концом длиной от 15 до 25 см были основой туловища будущей куклы, а раздвоенные концы — ее ногами. Палочки связывали нитками, на середину наматывали льняные очески (в современном исполнении — вату). Голову изготавливали, скатав шарик из тех же льняных оческов, затем его плотно обматывали лоскутком белой ткани, который у основания перевязывали ниткой.
Традиция изготовления обрядовой куклы «кукушки» в селе Тимоново Валуйского района Белгородской области.
Сначала кукушке делали головку — брали два-три кленовых листа, складывали их один на другой и петлей перегибали черешки. Затем листья заворачивали на манер юбки и всю конструкцию закрепляли нитью или троицкой травой (лесным мятликом). На головку могли надеть платочек, сделанный из лоскутка.

Волшебные куколки из ткани и трикотажа от Елены Гридневой. Полное пошаговое руководство по шитью

Уникальные куклы от знаменитого автора теперь в роскошном подарочном издании! Новая коллекция стильных и невероятно харизматичных маленьких кукол из ткани и трикотажа под сладким названием Монпансье: выкройки в натуральную величину, подробнейшие и богато иллюстрированные мастер-классы, удивительная галерея авторских кукол. Книга «Волшебные куколки из ткани и трикотажа от Елены Гридневой» станет любимой и взрослыми, и детьми! Сшить такое чудо по силам каждому!

О книге

Елена Гриднева — известный художник, создатель уникальных кукол из ткани и трикотажа, получивших признание во всем мире, представляет новую большую книгу!

Куколки, созданные автором, никого не оставляют равнодушными: ни детей, ни взрослых! Эти стильные миниатюрные создания настолько харизматичны, что невозможно удержаться и не попробовать сделать своими руками такое же чудо, для себя или в подарок самым близким.

Подробные и прекрасно иллюстрированные пошаговые мастер-классы позволят научиться этому, даже если вы обладаете только начальными навыками шитья, а галерея невероятных авторских кукол доставит ни с чем не сравнимое эстетическое удовольствие.

Содержание 

ОТ АВТОРА
ИНСТРУМЕНТЫ И МАТЕРИАЛЫ
ИНСТРУМЕНТЫ
МАТЕРИАЛЫ

  • Для тела куклы
  • Для одежды кукол

ОСНОВНЫЕ ПРИЕМЫ РАБОТЫ С ТКАНЬЮ И ДЕТАЛЯМИ
РАБОТА С ТКАНЬЮ

  • Подгиб ткани на клеевую ленту
  • Соединение тканей с помощью клеевой
  • Как обработать срез тонкой ткани
  • Сборка тканей машинной строчкой
  • Крепление пуговиц и мелких деталей с имитацией пришивного стежка

РУЧНЫЕ СТЕЖКИ И СТРОЧКИ

  • Сметочная строчка
  • Строчка «назад иглой»
  • Обметочная строчка
  • Потайная строчка

ОСНОВНЫЕ ПРИЕМЫ РАБОТЫ НАД КУКЛОЙ
ТЕЛО КУКЛЫ

  • Раскрой
  • Пошив
  • Рисуем кукле обувь
  • Крепление руки ног куклы
  • Глазки куклы

ПРИЧЕСКА КУКЛЫ

  • Изготовление тресса

ПРИЧЕСКА ДЛЯ КУКЛЫ «ПАРИЖАНКА»

  • Тканевая основа для тресса челки
  • Тканевая основа для тресса хвостика
  • Оформление тресса
  • Крепление тресса
  • Оформление прически

ПРИЧЕСКИ ДЛЯ КУКОЛ «КОРОЛЕВА МОТЫЛЬКОВ» И «ТАНЦОВЩИЦА»

  • Изготовление тканевой основы для тресса с имитацией пробора
  • Изготовление тканевой основы для тресса затылочной части головы
  • Оформление тресса
  • Крепление тресса
  • Оформление прически «Королева мотыльков»
  • Оформление прически «Танцовщица»

ПРИЧЕСКАДЛЯ КУКЛЫ «ШАМАНКА»
ПРИЧЕСКА ДЛЯ КУКЛЫ «ЗВЕЗДОЧЕТ»
ПРИЧЕСКАДЛЯ КУКЛЫ «ДЮЙМОВОЧКА»
ПРИЧЕСКАДЛЯ КУКЛЫ «ОЛЕНЕНОК»
ПРИЧЕСКАДЛЯ КУКЛЫ «ПРИНЦЕССА»
ПРИЧЕСКАДЛЯ КУКЛЫ «МАМАЗАЙЧИХА»
МАСТЕР-КЛАССЫ
ПАРИЖАНКА
ОЛЕНЕНОК
ТАНЦОВЩИЦА
МАМА ЗАЙЧИХА
ПРИНЦЕССА
ДЮЙМОВОЧКА
КОРОЛЕВА МОТЫЛЬКОВ
ЗВЕЗДОЧЕТ
ШАМАНКА
ВЫКРОЙКИ
ОСОБЕННОСТИ ВЫКРОЕК

  • Выкройка «Тело куклы»
  • Выкройка «Парижанка»
  • Выкройка «Олененок»
  • Выкройка «Танцовщица»
  • Выкройка «Мама Зайчиха»
  • Выкройка «Принцесса»
  • Выкройка «Дюймовочка»
  • Выкройка «Королева мотыльков»
  • Выкройка «Звездочет»
  • Выкройка «Шаманка»

Отзывы

Купила себе в подарок на день рождения! Прекрасная книга.
Хорошее, подарочное издание. Книга большая, 207 страниц. Красивые иллюстрации. Все написано понятным, доступным языком.
Очень довольна таким подарком.

Рожкова Дарья Леонидовна

Отличная качественная книга с пошаговыми мастер-классами от профессионала своего дела Елены Гридневой. Оформление книги таково, что ее смело можно назвать подарочным экземпляром. Книга очень богата качественными иллюстрациями, нет ни одной не проиллюстрированной страницы. Есть страницы на которых текст отсутствует вообще, но зато даны идеи для оформления композиций с куклами.

Содержание книги предусматривает работу с куклами от А до Я: необходимые инструменты, материалы, работа с тканью, виды стежков, раскрой, пошив, набивка, соединение и оформление деталей кукол. Показано, как можно сделать ниточный каркас для соединения ручек и ножек , как пришить волосы, как оформить лицо. Очень много различных вариантов одежды для кукол и различных аксессуаров (от украшений для волос, крылышек ,букетиков и т.п. до вигвама). Всего даны мастер-классы по изготовлению 9 куколок. Каждая куколка необычна, мила, а главное оформлена со вкусом. Тело всех куколок выполняется по одной выкройке, но изюминка каждой малышки в ее оформлении, над которым и придется потрудится, так как это самая трудоемкая, но и самая интересная работа. Все необходимые выкройки даны в натуральную величину в конце книги.
Вообще работа над данными куколками довольно кропотливая, т.к. они очень миниатюрны (на фото видно, что практически умещаются на ладони) и получается, что работа практически «ювелирная», но они того стоят. А если кто захочет изменить размер, то это можно будет несложно сделать, изменив масштаб выкроек.

Skarlet

Я влюбилась в кукол этого автора еще со времен первой книги. Но была тогда немного раздосадована тем, что она была недостаточно подробна для таких чайников как я, и пришлось многое додумывать и наверняка делать неправильно. Тем не менее, лошадка получилась, и вполне … как бы это сказать… самобытная. Очень импонирует ни на кого не похожий стиль этих очаровательных созданий.

И когда увидела в продаже эту книгу — схватила не задумываясь! И не пожалела! Во-первых, она толще, причем намного. И куколки совсем другие, хоть стиль Елены Гридневой ни с чем не перепутаешь.
Надо отдать должное. На этот раз в книге не просто ничего не пропущено, а подробнейшим образом описан и показан не то что процесс изготовления каждой детали, а даже и каждый стежок! Низко кланяюсь автору, умеющему извлекать уроки из своих ошибок и так блистательно их реализовывать! На этот раз все настолько понятно, что и я бы рискнула предложить книгу девочке-подростку, и наверняка она справится. Хоть на первый взгляд и не верится, что этих обаятельных малышек вообще создавали человеческие руки, настолько они живые. Но вот читаешь и видишь, как все понятно и в общем-то совсем несложно. Терпение только требуется недюжинное и внимание к каждой мелочи. Автор явно перфекционист! Боюсь, что на какое-то продолжительное время я пропаду с глаз людских — буду создавать свое собственное чудо!
Ах, да! Обязательно скажу еще огромное спасибо за оформление! Такие стильные, яркие фотографии, очень красиво все оформлено и расположено на страничках, позитив через край! А в обложку просто хочется войти и подружиться с этими милыми малышками, она как небо в солнечный день! Полиграфия очень качественная, бумага плотная, не бликует.
Думаю, и в подарок такую книгу преподнести каждый сочтет за честь!
Большое спасибо за доставленное удовольствие!
И да, Елена Гриднева один из лучших кукольников в нашей стране, а теперь еще и едва ли не лучший автор. Браво за книгу!

Семенова Валентина

Куколки супер! мастерить такие одно удовольствие!

Андрюшина Елена

У меня есть первая книга, очень она мне пригодилась и понравилась! Вторую ждала и было очень интересно посмотреть! Мне понравилось! вчера правда только купила и только успела посмотреть картинки,но собираюсь опробовать каждую модель!! Спасибо Елене! Книжку рекомендую!! очень интересно и подробно!!

Левченко Анжела

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

Куколка из бисера

Продолжаем тему плетения оригинальных брелков, и теперь мы вам предлагаем вот такие забавные изделия. Куколка из бисера станет приятным подарком для близкого человека. Кроме того, сам процесс изготовления не занимает больше 20 минут. Приятно, ведь каждая минута важна, когда тебя неожиданно приглашают на праздник, а прийти без подарка не удобно.

Инструменты и материалы Время: 45 минут • Сложность: 3/10

  • бисер разных цветов;
  • крупная деревянная бусина;
  • акриловые краски;
  • нитки мулине;
  • проволока.

Пошаговый мастер-класс

Подготовим для работы:

Шаг 1: оформляем лицо

Начнем работу с оформления личика куклы. Для этого используем деревянную бусину, акриловые краски и тонкую кисть. Рисуем мордашку так, как вам захочется.

Шаг 2: делаем волосы

Теперь берем нитки мулине, и формируем из них небольшой моточек подходящей длины. Это будут волосы куклы.

Обматываем моток проволокой по центру, нитки не жалеем, чем пышнее волосы, тем красивее кукла.

Шаг 3:  делаем тельце

Продеваем проволоку через голову-бусину и формируем ручки. Для этого нанизываем на один из хвостиков проволоки 6 бисерин розового цвета, и 5 белого, и возвращаем проволоку через розовый бисер обратно. Получается ручка куколки. Таким же образом формируем вторую ручку, и ножки.

На ножках количество розового бисера увеличивается, а вместо животика можно использовать небольшую бусину. В общем, в итоге у нас получается стандартная заготовка человека – ручки, ножки и голова.

Шаг 4: делаем платье

Теперь нашу куколку необходимо красиво одеть. Платье будем делать самое простое, хотя в дальнейшем вы сможете экспериментировать с нарядами как угодно.

Параллельным плетением делаем конус по размеру куколки. Потом надеваем его на изделие, формируем лямочки. Так наше платье будет надежно закреплено на куколке.

Кукла из бисера почти готова. Дело осталось за малым – готовим шарики, которые потом вставляем в руку нашей кукле, и оформляем прическу. Вариантов может быть масса, можно экспериментировать с длиной волос, выражениями лиц кукол, цветом и качеством нарядов.

Интересные прически для вашей куколки из разных материалов | Миадолла

В конце мастер-класса Вы можете посмотреть и сохранить себе выкройку куколки!

 

Заготовка куклы:

Инструменты необходимые для шитья:

Ножницы,  маркировочный карандаш MSS-06 «GAMMA,  иглы для закалывания,  линейка , швейная игла.

Материалы для создания заготовки куколки:

1. Ткань для пэчворка PEPPY KONA COTTON;

3. Нитки Полиэстер 40/2 «GAMMA»;

6. Нитки для вышивания «GAMMA» мулине №0420 черный;

7. Нитки для вышивания «GAMMA» мулине №0066 розовый;

7. Бусины «Zlatka» под жемчуг PSB-01 черный;

8. Синтепух «GAMMA»;

9. Картон.

 

Волосы из пряжи:

Необходимые  материалы: 

1. Нитки Полиэстер 40/2 «GAMMA» или нитки для вышивания «GAMMA» мулине №0032 терракотовый;

2. Ткань для пэчворка PEPPY 4517;

3. Картон 7х13 см;

4. Пряжа ADELIA «IVIA».

 

Кудри из пряжи:

Дополнительные приспособления:

2 ручки или карандаша.

Необходимые материалы: 

1. Нитки Полиэстер 40/2 «GAMMA»;

2. Гипюр «GAMMA» 3130 65 мм 8.8 м ±0.2 белый/розовый;

3. Пряжа Россия «Роза» 100\% хлопок 6 х 50 г №0101 (001) белый;

4. GAMMA» Проволока для плетения AWC-2 d 2 мм 10 м ±0.5 м №13 бл.розовый.

 

Волосы из фетра:

Необходимые  материалы: 

1. Нитки Полиэстер 40/2 «GAMMA» или нитки для вышивания «GAMMA» мулине №0022 св.коричневый;

2. Ткань для пэчворка PEPPY 4513;

3. «GAMMA» Проволока для плетения AWC-2 d 2 мм 10 м ±0.5 м №17 под золото;

4. Фетр декоративный А-270/250  206/6 желтый.

 

Кудрявые волосы:

Необходимые  материалы:

1. Тафта «одноцветная»TG-151 №07 васильковый;

2. Нитки для вышивания «GAMMA» мулине  №0018 бежевый;

3. «HobbyBe» HAR- 1 Волосы для кукол и игрушек (кудрявые) светло-русый;

4. Тесьма «BLITZ» MRC-10 10 мм №094 василек;

5. Пайетки «Zlatka» россыпью ZC 6 мм №09 золото.

 

Волосы из шерсти:

Дополнительные приспособления:

карандаши или ручки

Необходимые  материалы:

1. Ткань для пэчворка PEPPY 4517;

2. Тесьма отделочная «GAMMA» «ЗИГ-ЗАГ» JZ-9 9 мм 30 м №10 св.розовый;

3. Пряжа FY-050 «Шерсть для валяния» 100% мериносовая шерсть;

4. Лента атласная 12 мм ( 1/2 «) AL-12P «GAMMA» №005 розовый;

5. Иглы «GAMMA» для валяния (фелтинга) FNR-060.

 

Волосы из атласной ленты:

Дополнительные приспособления:

клей

Необходимые  материалы:

1. Ткань для пэчворка PEPPY 4517;

2. Фетр декоративный А-270/250  208/5 яр.оранжевый;

3. Фетр декоративный А-270/250 204/5 черный;

4. Лента атласная 50 мм ( 2 «) AL-50P №113 черный;

5. Нитки для вышивания «GAMMA» мулине  №0107 оранжевый;

6. Пуговица детская «GAMMA» AY 9939 14″ (9 мм) №247 хаки или №047 салатовый

 

Волосы из ткани:

Необходимые  материалы:

1. Ткань для пэчворка PEPPY 4517;

2. Ткань для пэчворка PEPPY KONA COTTON;

3. Фетр декоративный А-270/250 220/5 темно-красный;

4. Лента атласная 3 мм ( 1/8 «) AL-3P «GAMMA» №113 черный;

5. Тесьма декоративная «GAMMA» кружевная HVK-02 №001 белый.

 

 

Выкройка куколки:

(нажмите на изображение для увеличения)

 

 

 

Куколки из цветов :: Это интересно!

На днях забыли мы с Катей взять на прогулку игрушки. Но выход из положения всегда есть)) Я вспомнила, как мы сами в детстве на улице делали куколок из палочек и цветов.
Вот такие эльфийские принцессы у нас получились:
Куколки из цветов и веточек

Делаются эти куколки очень просто. Находим подходящие палочки с «ручками» и «ножками» (идеально подходят ветки клена татарского — у него боковые веточки в стороны отходят попарно):
Клен татарский
Его веточка похожа на человечка

Потом оборачиваем  палочку листиком как юбкой и привязываем ее травинками.
Делаем платье

После этого делаем голову — как подскажет фантазия. Мы использовали для своих куколок зеленые ягоды вишни, цветы одуванчика, таволги, шиповника. Их также приматываем травинками. Можно менять шляпки, парики, прически на все лады.
У Катиной принцессы голова из вишенки
Принцесса надела цветочную шляпку

А теперь играем:)
Вот дом принцесс — дерево.
Под елкой у них спаленка.
Эльфийские принцессы живут на деревьях
Спальня  под ветвями елки
Эльфийские кроватки

Вот к нам присоединился Витя со своим самодельным эльфом.


Эльф-принц

И мы устроили веселый бал на пеньке.

А тут я писала о том, как мы прямо на улице из подручных материалов делали еще игрушки: корзиночку и соломенного бычка, лошадку и гусениц, а еще искали буквы для Алфавита.

Другие наши поделки из листьев и цветов:
Насекомые, Картины из осенних листьев, Корона из осенних листьев-1, Корона из осенних листьев-2, Лото из листьев, Гербарий, Осенние полянки, Осенняя композиция, Зверюшки из палочек, Зверюшки из палочек-2.

Эти резиночки добавлю в галерею «Девичьи грезы» у Жени Ясной

Очищение огнём и куколки из теста. Как отмечают Навруз на Северном Кавказе | КУЛЬТУРА:События | КУЛЬТУРА

Международный праздник Навруз признан нематериальным культурным наследием ЮНЕСКО. Отмечают его 21 марта, в день весеннего равноденствия. Кто и как празднует Навруз на Северном Кавказе — в материале «АиФ-СК».

Не оторваться от земли

«Когда-то ногайцы в этот день собирались большими группами в полях, ставили там казаны для варки мяса, — рассказывает Патимат Савруева из села Сары-Су Шелковского района Чечни. – Жарили лепёшки на масле или пекли их в золе».

Всех гостей в праздник обязательно угощали ногайским чаем ногай шай. Его варили с солью, перцем, топлёным маслом и молоком.

Для праздничного стола готовили и сладости: ногайский вариант чак-чака под названием сахалва и традиционное лакомство йыпатак — обжаренные в масле маленькие квадратики сладкого теста.

Празднование Навруза сопровождалось народными гуляниями и спортивными состязаниями. Молодёжь соревновалась в национальных видах спорта, таких как табантрес. Двое соперников садились на землю и упирались друг в друга подошвами слегка согнутых ног. С разных сторон хватались руками за прочную палку. Побеждал тот, кто сумел оторвать соперника от земли, заставил его отпустить палку или коснуться земли локтём. Юноши проверяли свою силу и ловкость в национальной борьбе на поясах курес.

Чебуреки с яйцом и хлеб в виде солнца

В многонациональном Дагестане праздник весны начинали отмечать уже с середины марта. Одними из первых празднества устраивали жители Агульского района. Агульцы готовили для гостей чебуреки с начинкой из вареного яйца, расстегаи с форелью, пекли ржаной хлеб в виде солнца.

Жительница Махачкалы Диана Хамидова вспоминает, что её бабушка обычно готовила на Навруз праздничный сладкий плов. Рецепт очень простой – рис, специи, курага, изюм. Горку плова украшали сваренными в меду или сиропе ягодами и фруктами.

Это блюдо готовят и сегодня. «Рис тщательно промывают, высушивают. В сковородку наливают масло, разогревают, добавляют рис, обжаривают четыре минуты на среднем огне, периодически перемешивая. Изюм и курагу ошпаривают кипятком. Добавляют соль, корицу, шафран, сухофрукты в рис. Вливают горячую воду маленькими порциями. Варят до готовности», — поделилась рецептом Диана.

Её бабушка также радовала ребятишек куколками из хлеба, украшенными яйцом, фасолью и изюмом. Дети их не ели, но всегда с нетерпением ждали.

«В лакских сёлах в Навруз мать жениха приходила в дом к невесте с подарками, надевала на неё платок и поздравляла её родных», — рассказывает специалист республиканского дома народного творчества Дагестана Анастасия Денисенко.

На Навруз здесь готовили сладкий хинкал. Для его приготовления использовали яичное тесто, чёрный тмин, семена конопли и сахар. Из теста делали комочки, которые обжаривали в кипящем масле.

Лучший день для сватовства

У азербайджанцев Навруз символизирует наступление Нового года. Традиции празднования складывались веками: по некоторым данным, отмечают его на протяжении уже 700 лет.

«Наши предки разжигали большие костры и прыгали через них. Считалось, что в пламени остаются все плохие намерения и мысли. Этот день у нашего народа всегда считался самым благоприятным для сватовства и женитьбы», — рассказывает руководитель азербайджанской диаспоры на Ставрополье Фахраддин Ярыев.

На столе обязательно должны быть национальные блюда: плов, чыгыртма, лаванги, соютма, позартма, позбаш. Не обходилось и без знаменитых азербайджанских сладостей – пахлавы, шакарбуры, шорчорака и самани.

Живущие в Ставропольском крае курды в Навруз тоже готовят сладости, в том числе халву по национальному рецепту. Но большого застолья, как правило, не устраивают. 

«Раньше было принято водить хороводы вокруг больших костров, петь и танцевать», — рассказал глава национально-культурной автономии курдов Новоалександровского района края Гусейн Ахмедов.

Генеральная уборка и семь «С»

Руководитель таджикской диаспоры «Памир» в Северной Осетии Арсен Худододов пояснил, что Навруз переводится как «новый день». На родине Арсена этот праздник всегда ждут и отмечают с большим размахом: в Таджикистане для этого даже построили Дворец Навруза.

«Навруз считается днём первой борозды. В старину наши предки много работали на земле: пахали её и засеивали. Один из символов праздника – сумалак: полезное и вкусное блюдо из пророщенных зёрен пшеницы. Их также ставили на стол, как символ жизни и надежды на изобильный год», — делится Арсен.

На столе у таджиков в этот день по традиции должны находиться семь продуктов, названия которых начинаются на «с» — сумалак (паста из ростков с мукой), сипанд (семена руты), сирко (уксус), сэмени (проросшая пшеница), сабза (зелень), себ (яблоки), сир (чеснок) и сумах (барбарис).

В горной части Таджикистана ранним утром в Навруз мужчины помогали женщинам вынести всё из жилищ, чтобы проветрить и почистить. Это символизировало избавление от всего плохого, что скопилось за год. В жилище зажигали благовония и читали молитвы, чтобы прогнать нечистые силы. К вечеру, после генеральной уборки, всю вымытую и вычищенную домашнюю утварь  возвращали в дом.

Пока взрослые были заняты делами по хозяйству, старики рассказывали детям сказки, а молодёжь забавлялась состязаниями. Ребятишки ходили по соседям, желали им благополучия и счастья, а взамен получали подарки в виде сладостей.

Куклы из капрона: пошаговые мастер-классы, идеи, видео

Автор Teddy На чтение 5 мин. Просмотров 24k. Обновлено

О куклах из капрона нет единого мнения у рукодельниц. Кто-то считает их страшненькими, но большинство любит за выразительные лица и формы. И правда, до чего разные получаются куколки: красивые и забавные, похожие на настоящих людей и выдуманные персонажи.

Общие принципы изготовления

В основе изготовления куклы из капрона своими руками лежит сочетание двух материалов: синтепона и капроновых колготок. Вместе они создают пластичный материал, из которого можно “лепить” выразительную форму головы и тела куклы.

Как правило, у таких кукол лицо имеет ярко выраженную структуру: глаза, нос, губы, подбородок, щеки. Все четко выражено, часто даже гипертрофированно.

Кукла из капрона может быть каркасной и бескаркасной. В качестве каркаса используется проволока или пластиковая бутылка, синтепон. В бескаркасных моделях структура лица и фигуры моделируется за счет наполнителя и утяжек нитью.

Вам потребуются материалы:

  1. Синтепон однородный по составу. Наполнитель в виде шариков здесь не подойдет.
  2. Капроновые колготки без лайкры телесного цвета. Купите заранее подходящие, не слишком темные.
  3. Прочные нитки в цвет капрона для утяжки лица и крепления деталей.
  4. Для каркасной куклы: проволока или пластиковая бутылка.
  5. Акриловые краски, кисточка, если будете рисовать глаза.
  6. Кусочки ткани для одежды (нижнее белье, верхнее платье).
  7. Готовые глазки, которые можно купить в рукодельном магазине.
  8. Для волос можно использовать пряжу в мотках, гребенную пряжу для валяния, трессы (готовые волосы из магазина).
  9. Игла для валяния, если волосы будут будут крепиться методом валяния.
  10. Ножницы, швейные иглы, карандаш, клей.

Прежде чем шить куклу из капрона надо определиться с идеей: кем будет ваша куколка? Какой у нее будет характер, пол, возраст? Скорее всего у начинающей мастерицы не получится точно то, что задумано, но отправная точка (идея) должна быть.

Лицо капроновой куклы

Самое сложное — научится моделировать лицо. В видео показан простой процесс формирования лица куклы из капрона:

Как сформировать лицо куклы, как на представленных фотографиях? Это более сложно, потребуется тренировка. Порядок действий такой:

  • Возьмите трубообразную часть чулка. Наполните его посередине большим комом синтепона – для головы куклы, и небольшим спереди – для носа.
  • С помощью иглы с ниткой сформируйте переносицу и ноздри, делая несколько проколов в одну и ту же точку для закрепления утяжки.

Совет! Нитки нужно затягивать достаточно сильно для выделения отдельных частей, но не передавливать наполнитель.

Далее формируем губы, щеки и глазницы:

  • По бокам добавляются еще 2 круглых комочка синтепона — это щечки, и продолговатый под носом – губы.
  • Оформите уголки губ и глазные впадины.

Совет! Изначально отмерьте нитки достаточной длины, чтобы в ходе работы не пришлось делать лишних узлов. Кроме того, постоянно добавляйте или убирайте наполнитель по надобности.

  • Смоделируйте верхнюю и нижнюю губы.
  • Одновременно постепенно формируйте продолговатые глазницы, чтобы они не были похожи на точки. Иначе ваша кукла из капрона рискует остаться с маленькими глазками.
  • Проденьте иглу между губ. Постепенно стягивайте ротик в улыбку.
  • После всех этих действий нужно сделать переносицу более вытянутой.
  • В глазницы вклеиваются готовые кукольные глаза или рисуются от руки по желанию. Акриловыми красками лицу придаются живые очертания: румяные щеки, алый ротик, нос в веснушках.

Лучше один раз увидеть, чем несколько раз прочитать. Смотрите видео, как сформировать сложную скульптуру лица:

Р

учки и ножки из капрона

Следующие элементы по важности при изготовлении куклы из капрона – ладони и ступни. Сформируйте 2 одинаковых каркаса для ладошек и обтяните их наполнителем.

После этого укутайте каждую заготовку в квадратный кусочек капрона, свяжите в месте запястий. По принципу работы над частями тела сформируйте пальчики с их выпуклостями и ноготками. Аналогично формируем ступни.

Кукла-попик из капрона

Начать знакомство с куклами из капрона лучше с этой модели. Кукла попик наиболее проста в изготовлении. Особенность ее в том, что акцент делается на моделировании головы и «мягкой точки».

Такую куклу даже называют гадалкой-предсказательницей: какой стороной повернется к вам кукла — так и пойдут дела.

Мастерицы, щедрые на выдумку, шьют таких персонажей к профессиональным праздникам, можно найти куколок: врачей, поваров, полицейских и даже молодоженов.

Известный мастер по капроновым куклам Елена Володкевич рассказывает и показывает, как сделать куклу попика в этом видео:

Каркасная кукла из капрона

Следующий шаг мастерства — это кукла из капрона на каркасе. Общий порядок действий такой:

Из проволоки нужной длины сформируйте на ваше усмотрение каркас. Проволока должна быть достаточно жесткой, чтобы держать форму, но и достаточно мягкой, чтобы сгибалась руками. Задайте высоту куклы от 20 до 60 см. Пример пропорций на фото:

  • Плотно обтяните каркас рулонным синтепоном до нужного состояния, закрепите.
  • После этого нужно плотно соединить уже готовые части тела – голову и ладони – с каркасной частью.
  • Тело обтягивается капроном, после чего формируются все выступы.

Совет! Опытный кукольный мастер обязательно спрячет места соединения частей тела, замаскирует их нитками или под одеждой.

Сшейте одежку по своей идее и по примерам:

Кукла Невеста.Кукла Барыня.Кукла Повар.Кукла Бабушка.Кукла Ангел.

В видео ниже мастер Елена показывает, как сформировать лицо капроновой кукле, как сделать волосы из шерсти методом валяния, и как прикрепить голову к каркасу.

Кукла на основе картонной втулки

В качестве основы куклы из картона может выступать картонная втулка от фольги или пищевой пленки. Именно так выполнена кукла «Теща» Елены Володкевич. Вместо втулки можете использовать пластиковую бутылку.

Pupae — обзор | Темы ScienceDirect

Естественная история

Распространение. Морковная муха ржавчины, по-видимому, возникла в Европе и была впервые обнаружена в Северной Америке в 1885 году в Оттаве, Онтарио. Он достиг восточного побережья (штат Мэн) в 1893 году и западной части Северной Америки в 1920-х годах. В настоящее время он широко распространен на северо-востоке США и востоке Канады, а также на северо-западе США и западе Канады. Он отсутствует в засушливых центральных районах Канады и США, а также на севере Канады и на юге США.Муха ржавчины моркови также успешно вторглась в Новую Зеландию. Обычно для этого насекомого благоприятны прохладные и влажные места обитания.

Растения-хозяева. Личинки ржавой мухи моркови питаются растениями семейства Apiaceae (Umbelliferae). Пораженные овощные культуры включают морковь, сельдерей, сельдерей, кервель, пастернак и петрушку, но это насекомое считается в основном морковным вредителем. Он также обнаружен в зонтичных травах, таких как тмин, укроп и фенхель, и в таких сорняках, как дикая морковь, Daucus carota , и болиголов, Conium maculatum. Взрослые особи питаются цветами многих растений.

Диапазон хозяев интенсивно изучался в Англии, где около 100 зонтичных сорняков были идентифицированы в качестве подходящих хозяев. Лишь несколько растений этого семейства признаны непригодными (Hardman, Ellis, 1982; Hardman et al., 1990). Однолетние, двухлетние и многолетние виды могут поддерживать морковную ржавчину, но личинки мух плохо справляются с видами растений, которые не активно растут. Однолетние виды имеют тенденцию к снижению пригодности по мере прохождения сезона.Небольшое количество нецветущих растений способствует росту личинок морковной ржавчины, особенно цикория, эндивия и салата, но мухи не откладывают яйца на таких растениях. Записи, указывающие на эти сложноцветные растения как на растения-хозяева, по-видимому, основаны на необычных ситуациях, когда откладывающие яйца мухи воспринимали химические стимулы, вызванные более ранним присутствием зонтичных растений.

Естественные враги. Большая часть наших знаний о естественном регулировании численности населения была получена из британских исследований.Исследования таблиц дожития, проведенные Бёрном (1984), демонстрируют важность смертности яиц и ранних личинок в определении популяционных тенденций. Потеря яиц была вызвана как высыханием, так и хищничеством. Личиночный паразитоид Chorebus gracilis (Nees) (Hymenoptera: Braconidae) и куколочные паразитоиды, Eutrias tritoma (Thomson) (Hymenoptera: Eucoilidae) и Aleochara sparsa Heer (Coleoptera: Staphylinidae) в большом количестве. , но ни один из них не считается ключевым элементом регулирования численности населения.Осы были завезены в Канаду в начале 1950-х годов, но не прижились. Биология этих насекомых была дана Wright et al. (1947). Берн (1982), также работающий в Канаде, сообщил о том, что жуки (Coleoptera: Carabidae и Staphylinidae) поедают яйца, и подсчитал, что они часто являются причиной потери яиц на 20–40%. Lemay et al. (2018) сообщили, что на морковных полях Онтарио, Канада, обитало не менее 49 видов наземных хищников, наиболее важными из которых были мелкие жужелицы (Carabidae).

Грибы, особенно Entomophthora muscae , вызывают эпизоотии у морковной ржавой мухи. Сообщалось также о заражении взрослых особей Conidiobolus apiculatus и Erynia sp. Известно, что ни один из грибов не регулирует популяции мух (Eilenberg and Philipsen, 1988). Однако Эйленберг (1987) наблюдал измененное поведение к кладке яиц у мух, инфицированных E. muscae , на ранней стадии взрослой особи, предполагая, что они вносят несколько яиц в следующее поколение.

Жизненный цикл и распределение. Количество поколений варьируется от одного до трех в зависимости от климата. Не все поколения могут быть вредными, потому что одно может произойти до того, как урожай появится на поле или после того, как он будет собран. В Массачусетсе взрослые особи, развивающиеся после перезимовки, обычно становятся активными весной в мае-июне, а мухи первого поколения появляются в августе (Whitcomb, 1938). Общее время генерации в поле обычно составляет около 9–11 недель.Стивенсон (1981) измерил периоды развития от яйца до взрослой особи в 59, 70 и 81 день при 20 ° C, 17,5 ° C и 15 ° C соответственно. Летние мухи инициируют новое поколение, откладывая яйца в период с августа по сентябрь. Два периода активности взрослых также известны из Квебека (Boivin, 1987). Гетцин (1982) сообщил о третьем полете в октябре во время исследований в западном Вашингтоне; то же самое было и в соседней Британской Колумбии (Джадд и Вернон, 1985). Хотя диапаузирующие куколки обычно считаются стадией перезимовки, личинки также переживают холодную погоду и продолжают свое развитие без периода диапаузы.Это может привести к длительному или двухрежимному вылету мух весной. В некоторых случаях более высокая доля личинок зимует, чем куколок (Collier et al., 1994). Пороги развития довольно низкие для этого приспособленного к холоду вида; пороги развития яйца, личинки и куколки оцениваются в 4,5 ° C, 2,0 ° C и 1,5 ° C, соответственно (McLeod et al., 1985).

Яйцо. Самка откладывает небольшие скопления яиц, обычно по 1–3 яйца на кладку, в почву вокруг основания кормовых растений.Самка может откладывать до 150 яиц в течение своей жизни, но 40 яиц считаются средними в полевых условиях, а 100 яиц на самку обычно производятся в лаборатории. Яйцо белое, удлиненное, длиной 0,6–0,9 мм и шириной всего 0,15–0,20 мм. Он обозначен продольными гребнями, а на одном конце имеется коротко-суженный участок. Яйца вылупляются через 3–17 дней, в среднем обычно через 6–10 дней. Оптимальной как для откладки яиц, так и для вылупления яиц считается температура 15–20 ° C или ниже.

Личинка. Личинки сначала бесцветные, становятся молочно-белыми, а затем желтоватыми по мере созревания и в конечном итоге достигают длины 6–9 мм. Есть три возраста. У типичных мух туловище цилиндрическое, а голова сужается к концу и несет темные крючки для рта. Личинки часто сначала питаются боковыми корнями, а затем зарываются в главный корень по мере их увеличения. Продолжительность личиночного периода варьируется от 4 до 6 недель летом и более 3 месяцев зимой. Зрелые личинки оставляют корень для окукливания, обычно окукливаясь через 4–5 дней после достижения зрелости.

Куколка. Пупарий изначально желто-коричневого цвета, но при созревании меняется на коричневый, его длина составляет 4,5–5,0 мм. Куколки встречаются в почве рядом с пищевым растением, хотя некоторые из них распространяются на расстояние 10 см до окукливания, а большинство окукливаются на глубине 10–15 см. Продолжительность стадии куколки летом составляет около 25 дней, а зимой продолжается несколько месяцев. Ранняя стадия куколки чувствительна к условиям окружающей среды, и температурное воздействие на этой стадии определяет индукцию диапаузы.Если молодые куколки подвергаются воздействию температуры ниже 10 ° C, они могут войти в диапаузу (Stevenson, Barszcz, 1991).

Рис. 7.21. Взрослый самец ржавчины моркови.

(Рисунок USDA.)

Взрослый. Взрослые особи имеют длину 4,5–5,0 мм. Голова и ноги желтовато-коричневые, а грудь и брюшко блестящие черные. Тонкий слой желтоватых волосков покрывает грудную клетку и живот. Крылья слегка переливаются. Кончик брюшка сужается к концу у самок, но тупо закруглен у самцов.Прохладная погода и влажная почва способствуют появлению взрослых особей.

Подробное исследование биологии морковной ржавчины было дано Уиткомбом (1938). Всемирный обзор биологии и менеджмента был опубликован Dufault and Coaker (1987). Дополнительная полезная информация и процедуры выращивания были предоставлены McLeod et al. (1985). Бейрн (Beirne, 1971) дал ценный канадский взгляд на этот вредный организм.

Определение куколки по Merriam-Webster

пу · па | \ ˈPyü-pə \ множественные куколки \ ˈPyü- (ˌ) pē также — ˌpī \ или куколки

: Промежуточная, как правило, стадия покоя метаморфного насекомого (такого как пчела, моль или жук), которое возникает между личинкой и имаго, обычно заключено в кокон или защитное покрытие и претерпевает внутренние изменения, в результате которых строения личинок заменяются типичными для имаго

CURRENT PUPAE — Chrysalides and cocoons

PUPAE NEST

Гнездо куколок с использованием листов пенопласта — это инновационный метод, используемый WWB для содержания подземных куколок, в частности, и других куколок и коконов в идеальных условиях в появляющейся клетке.

• Разработано специально для подземных куколок: также идеально подходит для коконов и неприкрепленных куколок.

• Непосредственный доступ к куколкам для осмотра, без беспокойства.

• Обеспечивает здоровые и влажные условия.

Легко наблюдать за куколками, которые формируются до появления на свет.

Позволяет заводчику предвидеть появление требуемых самцов или самок.

Обеспечивает гигиену и предотвращает попадание вредных бактерий.

Этот метод оказался лучше, чем использование почвы или компоста, потому что он позволяет мгновенно проверить, когда это необходимо, удалить пустую оболочку куколки или любые мертвые куколки, а также иметь возможность очистить с минимальным беспокойством куколок. Куколки отдыхают в углублениях, в естественных условиях влажности и гигиены. Если бы они были на простых листах пенопласта, они бы катались по сторонам и не могли бы пользоваться влажностью, создаваемой углублениями, которые также обеспечивают разделение.Покрывающий лист пенопласта кладется качающейся стороной вниз, так что обе стороны с зазубринами находятся вместе, что обеспечивает некоторый воздушный поток и облегчает проход взрослым людям, которые могут вылезти и подняться, чтобы высушить свои крылья.

Куколки и пену следует тщательно опрыскивать (а не только распылять) каждый день или чаще при более высоких температурах. Основание верхнего лотка перфорировано для дренажа. Он находится в лотке без отверстий с блоком для разделения двух лотков и приема слитой воды.Этот дренаж позволяет обильно поливать, не опасаясь, что куколки будут лежать в воде.

Коконы также хорошо лежат на листе из пенопласта, обычно без другого листа, покрывающего их, хотя в исключительно жарких условиях влажный лист пенопласта поверх коконов помогает поддерживать влажность. Коконы требуют очень обильного полива, а не просто мелкого тумана. Тщательно замочите их, зная, что они хорошо осушены.

Куколки бабочек , которые в дикой природе не образуются под землей, обычно прикрепляются к ветке или другой поверхности, либо свисают с хвостового кремастера, либо (в зависимости от их семейства) вертикально и удерживаются на месте шелковым поясом.Вы можете попытаться имитировать это искусственно, или их можно положить на поверхность пенопласта и не покрывать. Пока они запотевают, чтобы избежать высыхания, бабочка обычно успешно формируется в таких куколках, уложенных на пену, а пористая поверхность помогает появляющейся бабочке хватать, чтобы вытащить себя из раковины куколки и подползти к сетке. стенка клетки, чтобы расширить и высушить ее крылья.

Время от времени рекомендуется удалять куколки, тщательно промывать пену, опрыскивать разбавленным отбеливателем (примерно 10% раствор, который не вреден для куколок), а затем заменять куколки на красивую влажную пену.Летом пену обычно моют примерно каждые 2–3 недели, используя горячую воду с небольшим количеством отбеливателя, но без мыла или моющего средства, которые могут вызвать образование пены и смыть с нее потребуется слишком много времени. Интервал промывки зависит от интенсивности вылупления и температуры. Любой намек на запах указывает на наличие бактерий и означает просрочку стирки. Когда взрослые особи выходят из куколки, продукт жизнедеятельности Meconium, выбрасывается. Это вредно, только если оставить так долго, что это портит свежесть и способствует развитию бактерий.Пустые куколки и любые другие органические вещества лучше всего удалять почаще, чтобы избежать скопления плесени или бактерий. В развивающейся клетке куколки, которые скучены вместе, могут образовывать слизь, вызванную бактериями, которая замедляет развитие и может убить куколок. Гнезда куколки помогают исключить такой риск, а периодическое мытье обеспечивает максимальную гигиену.

При мытье листов пенопласта также важно вымыть и продезинфицировать два лотка. Если вы насиживаете довольно много куколок, вам будет удобнее иметь два гнезда кукол, так что вы можете переместить кукол прямо в подготовленное чистое гнездо.Чтобы способствовать этому, на два гнезда, купленных вместе, снижена цена.

ДЛЯ ИНКУБАЦИИ куколок и КОКУНОВ У появляющейся клетки должны быть сетчатые стенки с хорошей вентиляцией. Это обеспечивает захват для начинающих взрослых, и вы можете добавить несколько палочек. В летних условиях вы можете инкубировать куколок умеренного климата при комнатной температуре без дополнительного нагрева, но когда станет прохладно, вы можете добавить тепла. При обогреве температуру окружающей среды можно поднять до 25º в течение нескольких дней, а при необходимости — до 30º.Воздух вокруг клетки нужно нагревать: они не справятся с этим, если тепло направлено на куколок или клетку. Не ставьте клетку на источник тепла. Вы не можете переливать коконы, пока они могут стекать. Вы можете повесить коконы: если вы это сделаете, то их потребуется более частый и обильный полив.

Гнездо куколки основано на стандартном лотке для семян размером 24 x 38 см , который подходит к стандартной пижамной клетке.

Куколки экзотических бабочек должны быть инкубированы, полностью затенены , в тропической теплице.Атмосферу тропической теплицы подражать непросто. Некоторым заводчикам удается воссоздать такие условия, но нам недостаточно просто добиться высокой температуры и влажности. Подробнее о том, как прикрепить куколки тропической бабочки к веткам или бамбуку, можно узнать во введении к разделу «Экзотические бабочки» на веб-сайте WWB. Куколки экзотических бабочек, которые не подвешены, а лежат свободно, можно положить на пену куколочного гнезда и оставить открытыми. Помните, что насиживающие куколки всегда должны находиться в полной тени.

Определение

в кембриджском словаре английского языка

Вид сверху и снизу на куколок, удаленных с головы муравья, по сравнению с куколкой, которая все еще скрывается справа. После того, как личинки превратились в куколки в форме запятой, взрослые самцы начинают слоняться, ожидая, когда вылупятся новые самки.

Еще примеры Меньше примеров

Ситуация усложняется, когда мухи превращаются в куколок , поскольку все они выглядят одинаково снаружи.Команда нашла ключ к разгадке, когда вскрыла почти 400 мух куколок . Поскольку большинство тропических бабочек живут недолго, экспонаты обычно заказывают новые куколки каждые две-три недели.Выводок медоносных пчел — личинки и куколок трутней — имеет большой потенциал в качестве источника пищи. Но теперь две группы ученых начали делать серию интимных изображений, показывающих, как те же самые гусеницы метаморфизируются внутри своих куколок .Интересно, однако, что сама гусеница привлекает хищников, которые также могут случайно атаковать куколку . В разные моменты весны и лета, в зависимости от вида, они переходят в краткую стадию куколок и , а затем превращаются в летающих насекомых.Коконы варят, а мертвые куколки удаляют и, в некоторых случаях, съедают в заводских цехах в качестве закуски. Он послушно стоит на страже куколок , вставая на задние лапы и яростно набрасываясь на все, что приближается, быстрыми взмахами головы.Личинки, куколки , и коконы размером и цветом с кусок сырого коричневого риса не ограничены только шкафами. куколок и особей, собранных в поле, были перенесены в клетку для откладки яиц. Эти куколок и были использованы для создания колонии.Вылупление оставляли на 48 ч, чтобы обеспечить полное вылетание всех паразитоидов из куколок .

Эти примеры взяты из корпусов и из источников в Интернете.Любые мнения в примерах не отражают мнение редакторов Cambridge Dictionary, Cambridge University Press или его лицензиаров.

Облучение личинок и куколок пупочного червя с помощью рентгеновских лучей (Lepidoptera: Pyralidae) | Журнал экономической энтомологии

» data-legacy-id=»s1″> Материалы и методы

» data-legacy-id=»s3″> Подготовка проб

» data-legacy-id=»s5″> Личинки поздней стадии

Личинки на поздней стадии (четвертая / пятая стадия) заданного пола (сегрегированные на основе видимости семенников через спинной покров самцов) помещали в чашки для образцов с диетой (3 червя на чашку, 10 чашек самцов и 10 чашек самок). на дозу облучения) и облучают в диапазоне 0, 10, 20, 30, 40 или 50 Гр.Облученных насекомых спаривали с товарищами по колонии и наблюдали, как описано выше для личинок ранней стадии.

» data-legacy-id=»s7″> Рентгеновское облучение
» data-legacy-id=»s9″> Куколки

Облучение куколок проводили в другом индивидуальном лабораторном рентгеновском кабинете, чем тот, который описан выше для облучения личинок. Потенциальное преимущество облучения на стадии куколки состоит в том, что насекомые обездвижены. Чтобы воспользоваться этим, была собрана рентгеновская система, в которой одна рентгеновская трубка была установлена ​​над вращающимся колесом так, чтобы рентгеновское окно находилось как можно ближе к поверхности колеса (рис.5). Колесо было наклонено под соответствующим углом к ​​рентгеновской трубке, так что доза рентгеновского излучения по горизонтали по поверхности колеса (слева направо на рис. 5) была однородной, как измерено с помощью чувствительной к рентгеновскому излучению пленки (тип HD. -V2 Gafchromic дозиметрические среды, Ashland Corp., Бриджуотер, Нью-Джерси). Экспонированную пленку анализировали с помощью радиохроматического считывающего устройства с оптической плотностью (модель 92D, Far West Technology, Голета, Калифорния). Обратите внимание, что пленочная дозиметрическая система не используется для измерения величины дозы, а просто для сравнения доз в фиксированном количестве точек по горизонтали поперек колеса для обеспечения однородности.Выход рентгеновской трубки был установлен на 90 кэВ и 9 мА. Полоски плотной бумаги (с прикрепленными куколками) были прикреплены к колесу с помощью липучки, обеспечивающей непосредственную близость к источнику для максимальной дозы. Поскольку куколки прошли один и тот же путь на колесе под рентгеновским окном в течение одного и того же времени, каждое насекомое получило одинаковую дозу с очень небольшой погрешностью. Система выращивания кукол (на полосках плотной бумаги) обеспечивала одинаковое представление всех куколок рентгеновскому потоку, поскольку они не были сложены друг на друга или скопированы вместе в контейнере, как это принято в обычной практике.Поглощенная доза измерялась той же системой измерения радиации, которая описана ранее для личинок. Колесо было создано с помощью 3D-принтера таким образом, что ионный зонд прикрепился к колесу и, таким образом, прошел тот же путь, что и насекомые, без перекручивания кабеля между зондом и считывателем. Система измерения была переведена в режим накопления дозы, так что рентгеновское излучение можно было просто выключить, когда желаемая доза была достигнута.

Рис. 5.

Конфигурация нестандартного лабораторного рентгеновского кабинета для прикрепления куколок NOW к вращающемуся колесу под источником рентгеновского излучения.

Рис. 5.

Конфигурация специализированного лабораторного рентгеновского кабинета для прикрепления куколок NOW к вращающемуся колесу под источником рентгеновского излучения.

» data-legacy-id=»s11″> Результаты

Смертность . Бесплодие . Доза (Гр) . n . % мертвых . χ 2 . п. . Значительная разница? б . n c . % Стерильно . χ 2 г . п. . Значительная разница? . 10 120 16,7 0,056 0,813 нет 98 40,0 5,44 0,02 9039 12,96 <0.001 да 76 53,6 9,73 0,002 да 30 120 76,7 120 76,7 36,34 9039 9039 <0,001 да 40 120 98,3 72,99 <0,001 да 49 100 x 9039 98.3 72,99 <0,001 да 49 100 x x x % Смертность = 2,167 * доза +9,667; R 2 = 0,934; т (2) = 6,53, P = 0,007; F = 42,68 % Стерильно = 1,98 * доза + 16,71; R 2 = 0,985; t (2) = 14,21, P = <0.001; F = 201,85 76,7
. Смертность . Бесплодие .
Доза (Гр) . n . % мертвых . χ 2 . п. . Значительная разница? б . n c . % Стерильно . χ 2 г . п. . Значительная разница? .
10 120 16,7 0,056 0,813 нет 98 40,0 5,44 0.02 да
20 120 53,3 12,96 <0,001 да 76 53,6 76 53,6 9,73 0,003 36,34 <0,001 да 62 71,4 13,23 <0,001 да
40 120 98.3 72,99 <0,001 да 49 100 x x x
50 120 98,3 98,3 100 x x x
% Смертность = 2,167 * доза +9,667; R 2 = 0,934; т (2) = 6.53, P = 0,007; F = 42,68 % Стерильно = 1,98 * доза + 16,71; R 2 = 0,985; t (2) = 14,21, P = <0,001; F = 201,85
Таблица 1.

Значительные различия в смертности и стерильности между облученными и необлученными личинками ранней стадии a

3
. Смертность . Бесплодие .
Доза (Гр) . n . % мертвых . χ 2 . п. . Значительная разница? б . n c . % Стерильно . χ 2 г . п. . Значительная разница? .
10 120 16,7 0,056 0,813 нет 98 40,0 5,44 0,02 9039 12,96 <0,001 да 76 53.6 9,73 0,002 да
30 120 76,7 36,34 <0,001 да 62 71,4 40 120 98,3 72,99 <0,001 да 49 100 x x x
50 72,99 <0,001 да 49 100 x x x
% Смертность = 2,167 * доза +9,667; R 2 = 0,934; т (2) = 6,53, P = 0,007; F = 42,68 % Стерильно = 1,98 * доза + 16,71; R 2 = 0,985; t (2) = 14,21, P = <0.001; F = 201,85
76,7
. Смертность . Бесплодие .
Доза (Гр) . n . % мертвых . χ 2 . п. . Значительная разница? б . n c . % Стерильно . χ 2 г . п. . Значительная разница? .
10 120 16,7 0,056 0,813 нет 98 40,0 5,44 0.02 да
20 120 53,3 12,96 <0,001 да 76 53,6 76 53,6 9,73 0,003 36,34 <0,001 да 62 71,4 13,23 <0,001 да
40 120 98.3 72,99 <0,001 да 49 100 x x x
50 120 98,3 98,3 100 x x x
% Смертность = 2,167 * доза +9,667; R 2 = 0,934; т (2) = 6.53, P = 0,007; F = 42,68 % Стерильно = 1,98 * доза + 16,71; R 2 = 0,985; t (2) = 14,21, P = <0,001; F = 201,85

Рис. 6.

Смертность и бесплодие личинок на ранней стадии NOW при дозе рентгеновского излучения.

Рис. 6.

Смертность и бесплодие личинок на ранней стадии NOW при дозе рентгеновского излучения.

Личинки поздней стадии

Смертность и бесплодие облученных рентгеновскими лучами личинок поздней стадии показано в Таблице 2 и на Рис.7. Анализ показывает, что мужская смертность значительно отличается от контроля при дозах выше 30 по сравнению с 20 Гр для женщин. Хотя более высокая чувствительность наблюдалась у женщин при всех дозах ниже 50 Гр, 97% смертность наблюдалась для обоих полов на уровне 50 Гр. В целом, 100% бесплодие выживших наблюдалось как у самок, так и у самцов при дозах 40 Гр и выше. Смертность сильно коррелирует с дозой как для мужчин ( R 2 = 0,892), так и для женщин ( R 2 = 0.948), как и стерильность с R 2 = 0,944 для мужчин и 0,918 для женщин (Таблица 2).

Таблица 2.

Значительные различия в смертности и стерильности между облученными и необлученными личинками поздней стадии a

1 %87 * доза — 8,87; R 2 = 0,891; t (2) = 5,73, P = 0,004; F = 32,91 % Стерильно = 2,29 * доза — 2,18; R 2 = 0,944; t (2) = 8,21, P = 0,0012; F = 67,36 2,45 0,001 2 038 * доза — 4,267; R 2 = 0,948; т (2) = 8,54, P = 0,001; F = 73,02 % Стерильно = 2,8 * доза — 15,32; R 2 = 0,875; т (2) = 4,58, P = 0,0195; F = 21,04
. Мужская смертность . Мужское бесплодие .
Доза (Гр) . n . % мертвых . χ 2 . п. . Значительная разница? . n . % Стерильно . χ 2 . п. . Значительная разница? .
10 60 6.7 0,268 1,0 нет 56 7,1 0,519 0,471 нет
20 60 13,3 9039 9039 9039 9039 9039 50,0 15.805 <0,001 да
30 60 36,7 6,285 0,01 да 47 73.7 25,967 <0,001 да
40 60 66,7 20,742 <0,001 да 38
50 60 96,7 45,117 <0,001 да 29 100 6,741 <0,001 да
Женская смертность Женское бесплодие
Доза (Гр) n % Погибло χ 2 Значительная разница n % Стерильно χ 2 P Значительная разница?
10 60 0 0.517 0,472 нет 58 3,3 0,001 0,972 нет
20 60 36,7 6,285 0,03 0,118 нет
30 60 60,0 16,875 <0,001 да 40 83.3 26,825 <0,001 да
40 60 80,0 29,932 <0,001 да 34
50 60 96,7 45,117 <0,001 да 29 100 6,741 <0,001 да
1 %87 * доза — 8,87; R 2 = 0,891; t (2) = 5,73, P = 0,004; F = 32,91 % Стерильно = 2,29 * доза — 2,18; R 2 = 0,944; t (2) = 8,21, P = 0,0012; F = 67,36 2,45 0,001 2 038 * доза — 4,267; R 2 = 0,948; т (2) = 8,54, P = 0,001; F = 73,02 % Стерильно = 2,8 * доза — 15,32; R 2 = 0,875; т (2) = 4,58, P = 0,0195; F = 21,04
. Мужская смертность . Мужское бесплодие .
Доза (Гр) . n . % мертвых . χ 2 . п. . Значительная разница? . n . % Стерильно . χ 2 . п. . Значительная разница? .
10 60 6.7 0,268 1,0 нет 56 7,1 0,519 0,471 нет
20 60 13,3 9039 9039 9039 9039 9039 50,0 15.805 <0,001 да
30 60 36,7 6,285 0,01 да 47 73.7 25,967 <0,001 да
40 60 66,7 20,742 <0,001 да 38
50 60 96,7 45,117 <0,001 да 29 100 6,741 <0,001 да
Женская смертность Женское бесплодие
Доза (Гр) n % Погибло χ 2 Значительная разница n % Стерильно χ 2 P Значительная разница?
10 60 0 0.517 0,472 нет 58 3,3 0,001 0,972 нет
20 60 36,7 6,285 0,03 0,118 нет
30 60 60,0 16,875 <0,001 да 40 83.3 26,825 <0,001 да
40 60 80,0 29,932 <0,001 да 34
50 60 96,7 45,117 <0,001 да 29 100 6,741 <0,001 да
Таблица 2.

Значительные различия в смертности и стерильности между облученными и необлученными личинками поздней стадии a

2,45 0,001 2 038 * доза — 4,267; R 2 = 0,948; т (2) = 8,54, P = 0,001; F = 73,02 % Стерильно = 2,8 * доза — 15,32; R 2 = 0,875; т (2) = 4,58, P = 0,0195; F = 21,04
. Мужская смертность . Мужское бесплодие .
Доза (Гр) . n . % мертвых . χ 2 . п. . Значительная разница? . n . % Стерильно . χ 2 . п. . Значительная разница? .
10 60 6,7 0,268 1,0 нет 56 7,1 0,519 0,471 9039 0,185 0,671 нет 54 50,0 15.805 <0,001 да
30 60 36,7 6,285 0,01 да 47 73,7 25.93 73,7 25.967 60 66,7 20,742 <0,001 да 38 100 33,018 <0,001 да
50 603937 45,117 <0,001 да 29 100 6,741 <0,001 да
% Смертность = 1,87 * 7 доза -8 R 2 = 0,891; t (2) = 5,73, P = 0,004; F = 32,91 % Стерильно = 2,29 * доза — 2,18; R 2 = 0,944; t (2) = 8,21, P = 0.0012; F = 67,36
Женская смертность Женское бесплодие
Доза (Гр) n % Погибло χ 2 Значительная разница n % Стерильно χ 2 P Значительная разница?
10 60 0 0.517 0,472 нет 58 3,3 0,001 0,972 нет
20 60 36,7 6,285 0,03 0,118 нет
30 60 60,0 16,875 <0,001 да 40 83.3 26,825 <0,001 да
40 60 80,0 29,932 <0,001 да 34
50 60 96,7 45,117 <0,001 да 29 100 6,741 <0,001 да
1 %87 * доза — 8,87; R 2 = 0,891; t (2) = 5,73, P = 0,004; F = 32,91 % Стерильно = 2,29 * доза — 2,18; R 2 = 0,944; t (2) = 8,21, P = 0,0012; F = 67,36 2,45 0,001 2 038 * доза — 4,267; R 2 = 0,948; т (2) = 8,54, P = 0,001; F = 73,02 % Стерильно = 2,8 * доза — 15,32; R 2 = 0,875; т (2) = 4,58, P = 0,0195; F = 21,04
. Мужская смертность . Мужское бесплодие .
Доза (Гр) . n . % мертвых . χ 2 . п. . Значительная разница? . n . % Стерильно . χ 2 . п. . Значительная разница? .
10 60 6.7 0,268 1,0 нет 56 7,1 0,519 0,471 нет
20 60 13,3 9039 9039 9039 9039 9039 50,0 15.805 <0,001 да
30 60 36,7 6,285 0,01 да 47 73.7 25,967 <0,001 да
40 60 66,7 20,742 <0,001 да 38
50 60 96,7 45,117 <0,001 да 29 100 6,741 <0,001 да
Женская смертность Женское бесплодие
Доза (Гр) n % Погибло χ 2 Значительная разница n % Стерильно χ 2 P Значительная разница?
10 60 0 0.517 0,472 нет 58 3,3 0,001 0,972 нет
20 60 36,7 6,285 0,03 0,118 нет
30 60 60,0 16,875 <0,001 да 40 83.3 26,825 <0,001 да
40 60 80,0 29,932 <0,001 да 34
50 60 96,7 45,117 <0,001 да 29 100 6,741 <0,001 да

Рис. 7.

Смертность и бесплодие личинок поздней стадии ТЕПЕРЬ (самцы и самки) по дозе рентгеновского излучения.

Фиг.7.

Смертность и бесплодие личинок поздней стадии NOW (самцов и самок) при дозе рентгеновского излучения.

Куколки

Смертность и бесплодие куколок, облученных рентгеновским излучением, показаны в Таблице 3 и на Рис. 8. Анализ показывает, что смертность самцов значительно отличается от контроля при дозах выше 30 по сравнению с 20 Гр для самок, как и у личинок поздних стадий. Опять же, более высокая чувствительность наблюдалась у женщин при всех дозах ниже 50 Гр. Выше 40 Гр наблюдалась 97% смертность мужчин и полная смертность женщин.Полная стерильность выживших наблюдалась у самцов при дозах 40 Гр и выше, в то время как ни одна самка не выжила, чтобы пройти тестирование в этих дозах. Смертность сильно коррелирует с дозой как для мужчин ( R 2 = 0,843), так и для женщин ( R 2 = 0,918), как и стерильность с R 2 = 0,971 для мужчин и 0,929 для женщин. (Таблица 3).

Таблица 3.

Значительные различия в смертности и бесплодии облученных и необлученных куколок a

9039
. Мужская смертность . Мужское бесплодие .
Доза (Гр) . n . % мертвых . χ 2 . п. . Значительная разница? . n . % Стерильно . χ 2 . п. . Значительная разница? .
10 60 13,3 0,12 0,729 нет 50 39,3 2,214 0,137 9039 9039 9039 9039 9039 1,313 0,252 нет 43 47,4 3.395 0,065 нет
30 60 53,3 5,813 0,016 да 38 71,4 9,164 96,7 33,189 <0,001 да 25 100 0,586 0,444 x
50 60 7 33,189 <0,001 да 25 100 0,586 0,444 x
% Смертность = 1,93 * доза + 5,32; R 2 = 0,843; t (2) = 4,02, P = 0,028; F = 16,14 % Стерильно = 1,98 * доза +15,22; R 2 = 0,971; t (2) = 10,06, P = 0.002; F = 101,3
Женская смертность Женское бесплодие
Доза (Гр) n % Мертвый χ 2 9011 9039 Значимая разница? n % Стерильно χ 2 P Значительная разница?
10 60 16.7 0 1 нет 51 36,0 1,87 0,172 нет
20 60 43,3 9039 9039 9039 9039 9039 9039 4,2 41,2 2,365 0,124 нет
30 60 50,0 7,702 0,006 да 41 73.3 11,384 <0,001 Да
40 60 100 42,42 <0,001 да 26 50 60 100 42,42 <0,001 да 26 x x x
% Смертность97 * доза +4,59; R 2 = 0,918; т (2) = 6,70, P = 0,0026; F = 44,85 % Стерильно = 1,79 * доза +14,64; R 2 = 0,929; t (2) = 5,11, P = 0,0362; F = 26,12
9039
. Мужская смертность . Мужское бесплодие .
Доза (Гр) . n . % мертвых . χ 2 . п. . Значительная разница? . n . % Стерильно . χ 2 . п. . Значительная разница? .
10 60 13.3 0,12 0,729 нет 50 39,3 2,214 0,137 нет
20 60 36,7 9039 9039 9039 43 9039 9039 43 9039 47,4 3,395 0,065 нет
30 60 53,3 5,813 0,016 да 38 71.4 9,164 0,002 да
40 60 96,7 33,189 <0,001 да 25 10086 50 60 96,7 33,189 <0,001 да 25 100 0,586 0,444 x
% Смертность93 * доза + 5,32; R 2 = 0,843; t (2) = 4,02, P = 0,028; F = 16,14 % Стерильно = 1,98 * доза +15,22; R 2 = 0,971; т (2) = 10,06, P = 0,002; F = 101,3
Женская смертность Женское бесплодие
Доза (Гр) n % Мертвый χ 2 9011 9039 Значимая разница? n % Стерильно χ 2 P Значительная разница?
10 60 16.7 0 1 нет 51 36,0 1,87 0,172 нет
20 60 43,3 9039 9039 9039 9039 9039 9039 4,2 41,2 2,365 0,124 нет
30 60 50,0 7,702 0,006 да 41 73.3 11,384 <0,001 Да
40 60 100 42,42 <0,001 да 26 50 60 100 42,42 <0,001 да 26 x x x
% Смертность97 * доза +4,59; R 2 = 0,918; т (2) = 6,70, P = 0,0026; F = 44,85 % Стерильно = 1,79 * доза +14,64; R 2 = 0,929; t (2) = 5,11, P = 0,0362; F = 26,12
Таблица 3.

Значительные различия в смертности и бесплодии между облученными и необлученными куколками a

9039
. Мужская смертность . Мужское бесплодие .
Доза (Гр) . n . % мертвых . χ 2 . п. . Значительная разница? . n . % Стерильно . χ 2 . п. . Значительная разница? .
10 60 13,3 0,12 0,729 нет 50 39,3 2,214 0,137 9039 9039 9039 9039 9039 1,313 0,252 нет 43 47,4 3.395 0,065 нет
30 60 53,3 5,813 0,016 да 38 71,4 9,164 96,7 33,189 <0,001 да 25 100 0,586 0,444 x
50 60 7 33,189 <0,001 да 25 100 0,586 0,444 x
% Смертность = 1,93 * доза + 5,32; R 2 = 0,843; t (2) = 4,02, P = 0,028; F = 16,14 % Стерильно = 1,98 * доза +15,22; R 2 = 0,971; t (2) = 10,06, P = 0.002; F = 101,3
Женская смертность Женское бесплодие
Доза (Гр) n % Мертвый χ 2 9011 9039 Значимая разница? n % Стерильно χ 2 P Значительная разница?
10 60 16.7 0 1 нет 51 36,0 1,87 0,172 нет
20 60 43,3 9039 9039 9039 9039 9039 9039 4,2 41,2 2,365 0,124 нет
30 60 50,0 7,702 0,006 да 41 73.3 11,384 <0,001 Да
40 60 100 42,42 <0,001 да 26 50 60 100 42,42 <0,001 да 26 x x x
% Смертность97 * доза +4,59; R 2 = 0,918; т (2) = 6,70, P = 0,0026; F = 44,85 % Стерильно = 1,79 * доза +14,64; R 2 = 0,929; t (2) = 5,11, P = 0,0362; F = 26,12
9039
. Мужская смертность . Мужское бесплодие .
Доза (Гр) . n . % мертвых . χ 2 . п. . Значительная разница? . n . % Стерильно . χ 2 . п. . Значительная разница? .
10 60 13.3 0,12 0,729 нет 50 39,3 2,214 0,137 нет
20 60 36,7 9039 9039 9039 43 9039 9039 43 9039 47,4 3,395 0,065 нет
30 60 53,3 5,813 0,016 да 38 71.4 9,164 0,002 да
40 60 96,7 33,189 <0,001 да 25 10086 50 60 96,7 33,189 <0,001 да 25 100 0,586 0,444 x
% Смертность93 * доза + 5,32; R 2 = 0,843; t (2) = 4,02, P = 0,028; F = 16,14 % Стерильно = 1,98 * доза +15,22; R 2 = 0,971; т (2) = 10,06, P = 0,002; F = 101,3
Женская смертность Женское бесплодие
Доза (Гр) n % Мертвый χ 2 9011 9039 Значимая разница? n % Стерильно χ 2 P Значительная разница?
10 60 16.7 0 1 нет 51 36,0 1,87 0,172 нет
20 60 43,3 9039 9039 9039 9039 9039 9039 4,2 41,2 2,365 0,124 нет
30 60 50,0 7,702 0,006 да 41 73.3 11,384 <0,001 Да
40 60 100 42,42 <0,001 да 26 50 60 100 42,42 <0,001 да 26 x x x
% Смертность97 * доза +4,59; R 2 = 0,918; т (2) = 6,70, P = 0,0026; F = 44,85 % Стерильно = 1,79 * доза +14,64; R 2 = 0,929; t (2) = 5,11, P = 0,0362; F = 26,12

Рис. 8.

Смертность и бесплодие куколок NOW (самцов и самок) по дозе рентгеновского излучения.

Рис. 8.

Смертность и бесплодие куколок NOW (самцов и самок) по дозе рентгеновского излучения.

Обсуждение

Husseiny и Madsen (1964) сообщили о стерилизации личинок и куколок NOW с помощью гамма-излучения при дозах от 30 до 60 Гр. Между этими двумя дозами не было получено никаких данных, поэтому фактическая стерилизующая доза является предположительной. Тем не менее, эти результаты согласуются с данными, наблюдаемыми здесь при стерилизации с помощью рентгеновских лучей. С другой стороны, как для куколок, так и для взрослых бабочек Husseiny и Madsen (1964) сообщили о необходимых дозах гамма-излучения для стерилизации где-то между 300 и 400 Гр, в то время как Light et al.(2015) сообщили о стерилизации взрослых самцов моли с помощью рентгеновских лучей при дозе 125 Гр. Для настоящего исследования куколки оказались стерильными при дозах рентгеновского излучения всего 40 Гр. Причины различий в заявленных требуемых дозах для стерилизации взрослого мужчины СЕЙЧАС между рентгеновскими лучами и гамма-лучами (Husseiny and Madsen 1964) являются спекулятивными и могут быть связаны со многими вещами, включая разные методы дозиметрии, различия в способах оценки стерильности или различия в том, как рентгеновские лучи и гамма-лучи взаимодействуют с биологическим материалом.Для рентгеновских исследований использовался калиброванный ионный зонд NIST. Для гамма-облучения (Husseiny and Madsen 1964) дозы были интерполированы на основе расстояния от источника кобальта-60, откалиброванного с помощью дозиметра сульфата железа Fricke, как описано Weiss et al. (1956). Подробности определения соответствующих расстояний от источника не сообщаются. Для большинства источников гамма-излучения дозиметрия основана на известной кривой затухания источника. Необходимо дальнейшее исследование различий в результатах рентгеновского и гамма-излучения.

Нет сообщений об исследованиях гамма-облучения личинок NOW на ранней стадии для сравнения, поскольку Husseiny и Madsen (1964) использовали только зрелых личинок. Относительно высокий уровень смертности (20%) для необлученных насекомых согласуется с тем, о котором сообщают Husseiny и Madsen (1964) для взрослых личинок (17%), и значительно ниже, чем уровень смертности 64% для недавно вылупившихся новорожденных, что является нормальным для популяций насекомых. (Хусейни и Мадсен 1964). Будет ли такой уровень смертности приемлемым для программы МСН, будет зависеть от способности производить обработанных личинок с достаточно высокой скоростью для поглощения потерь, приспособленности стерильных бабочек и относительных преимуществ использования личинок ранней стадии по сравнению с на других этапах жизни, и никакие текущие программы МСН не стерилизуют личинок или куколок.Снижение смертности необлученных контрольных личинок поздней стадии (6,7%) по сравнению с личинками ранней стадии согласуется с данными Husseiny и Madsen (1964). Кроме того, в текущем исследовании личинки на поздней стадии имели более низкую смертность, чем личинки на ранних стадиях при всех дозах.

Куколки, использованные в гамма-исследовании (Husseiny and Madsen 1964), были отобраны на наиболее продвинутой стадии развития, то есть на восьмой (из девяти) день окукливания, и, таким образом, были почти готовы к появлению взрослых особей.Представленные результаты указывают на низкую смертность куколок при дозах, необходимых для стерилизации (около 300 Гр). ТЕПЕРЬ куколкам, используемым в данном исследовании, требуется в среднем 13–14 дней, чтобы выйти из коконов. Помимо вероятного влияния температуры и неопределенности точного возраста отобранных личинок поздней стадии для помещения в лотки, разница в периодах окукливания между двумя исследованиями может быть связана с тем фактом, что Хусейни и Мэдсен (1964) использовали дикие популяции. , в то время как бабочки, использованные для этого исследования, выращивались в лаборатории в течение примерно 10 лет.Здесь куколки были отобраны на седьмой день, на полпути к стадии куколки, и поэтому они были менее зрелыми, чем куколки, изученные Хусейни и Мадсеном (1964). Далее можно предположить, что бабочки в середине стадии куколки претерпевают метаморфоз и могут быть особенно уязвимы для радиации, тогда как те, которые вот-вот появятся, в основном взрослые. Необходимы дополнительные исследования для сравнения радиочувствительности на разных стадиях окукливания.

Как указывалось ранее, облучение СЕЙЧАС как личинок или куколок может иметь преимущества по сравнению со взрослыми особями.Личинок, и особенно куколок, легче содержать, и они, вероятно, не нуждаются в охлаждении, как в случае взрослых бабочек. Снижение требуемых доз (для гамма- или рентгеновского излучения) может обеспечить более высокую пропускную способность, снижение затрат и, возможно, повышение пригодности. Стерилизация личинок / куколок снизит сложность стерилизации и доставки к месту выпуска. Однако результаты этого исследования не указывают на преимущество рентгеновских лучей перед гамма-излучением с точки зрения снижения смертности обработанных насекомых ни личинок, ни куколок.Существует некоторый потенциал для снижения показателей смертности с помощью лечения насекомых (радиосенсибилизация или радиозащита), например, изменение атмосферы или применение природных соединений в рационе насекомых (Liang et al.2019). Требуются дальнейшие исследования в этой области.

Мера стерильности, обычно используемая в исследованиях облучения вредителей Lepidoptera , включает документирование скорости вывода яиц обработанных бабочек и последующее отслеживание потомства до следующего поколения для определения наследственной стерильности (Carpenter et al.2005, 2010; Light et al. 2015). Цель этого исследования состояла в том, чтобы определить пригодность облученных рентгеновскими лучами личинок и куколок NOW для SIT, учитывая, что ранее опубликованные исследования с использованием гамма-облучения пришли к выводу, что они не являются подходящими кандидатами на основании высоких показателей смертности. Выбор использовать отсутствие потомства (новорожденных) в качестве меры бесплодия позволил более простым и менее трудоемким способом определить потенциальную пригодность личинок и куколок NOW для SIT под воздействием рентгеновского излучения, а не гамма-излучения.Он не предлагается в качестве замены более комплексного подхода, который был бы оправдан, если бы результаты предполагали осуществимость.

В целом, хотя и неубедительное, это исследование поддерживает гипотезу о биологической эквивалентности рентгеновских лучей и гамма-излучения в равных дозах. Однако для подтверждения этого необходимы гораздо больше исследований, особенно с точки зрения влияния гамма-излучения по сравнению с рентгеновскими лучами на здоровье и жизнеспособность обработанного насекомого. Наконец, хотя это исследование не подтвердило гипотезу о том, что низкоэнергетическое рентгеновское излучение обеспечивает лучшую пригодность по сравнению с гамма-излучением в эквивалентных дозах, оно демонстрирует эффективность коммерчески доступного низкоэнергетического облучения на основе рентгеновской трубки для стерилизации насекомых.Преимущества рентгеновского излучения перед гамма-излучением для таких целей стали очевидными, и остаются значительные возможности для дальнейших исследований и разработок.

Пользовательские рентгеновские системы, используемые для этого исследования, имеют преимущества по сравнению с теми, которые регулярно используются в программах SIT. Все компоненты коммерчески доступны и широко используются в области проверки безопасности и неразрушающей визуализации. Они экономичны и надежны по сравнению с источниками гамма-излучения или источниками рентгеновского излучения высокой энергии. Облучение насекомых в один слой, как это было сделано с куколками, выгодно с точки зрения точности и однородности дозы, а также приспособленности появляющихся бабочек.Однако в нынешнем виде система не способна стерилизовать насекомых со скоростью, необходимой для программы МСН, и поэтому подходит только для исследовательских целей. Дальнейшие разработки для увеличения пропускной способности продолжаются, и необходимо определить приемлемость с точки зрения стоимости стерилизованного насекомого. Кроме того, мы полагаем, что дальнейшие исследования ОБЭ рентгеновских лучей низкой энергии (<100 кэВ) по сравнению с гамма-источниками (> 1 МэВ) или рентгеновскими лучами высокой энергии (обычно> 5 МэВ) применительно к пригодности высвобождаемых моль оправдана, несмотря на широко распространенное мнение, что они эквивалентны.

Цитированных источников:

Бакри

,

А.

,

К.

Мехта

и

Д. Р.

Копье

.

2005а

.

Стерилизация насекомых ионизирующим излучением,

с.

233

268

. In

V. A.

Dyck

,

J.

Hendrichs

и

A. S.

Robinson

(ред.),

Метод стерильных насекомых.Принципы и практика комплексной борьбы с вредителями на всей территории

.

Springer

,

Дордрехт, Нидерланды

.

Бакри

,

A.

,

N.

Heather

,

J.

Hendrichs

и

I.

Ferris

.

2005b

.

Пятьдесят лет радиационной биологии в энтомологии: уроки, извлеченные из IDIDAS

.

Ann. Энтомол. Soc. Am

.

98

:

1

12

.

Блум

,

С.

,

К. А.

Блум

,

Дж. Э.

Карпентер

и

К. О.

Калкинс

.

2001

.

Сезонный выпуск частично стерильных самцов для борьбы с плодожоркой (Lepidoptera: Tortricidae) в Вашингтонских яблоках

.

Environ. Энтомол

.

30

:

763

769

.

Boardman

,

L.

,

T.

Grout

и

J.

Тербланш

.

2012

.

Ложная плодожорка Thaumatotibia leucotreta (Lepidoptera, Tortricidae) Личинки чувствительны к холоду

.

Наука о насекомых

.

19

:

315

328

.

Campbell

,

B. C.

,

R. J.

Molyneux

и

T. F.

Schatzki

.

2003

.

Текущие исследования по снижению загрязнения U.С. миндаль, фисташка и грецкий орех

.

J. Toxicol. Токсин Рев

.

22

:

225

266

.

Карпентер

,

J. E

.

2000

.

Интеграция стерильности чешуекрылых F1 и усиленный биологический контроль по всему району,

стр.

193

200

. In

K. H.

Tan

(ред.), Труды: Повсеместная борьба с плодовыми мухами и другими насекомыми-вредителями. Международная конференция по борьбе с насекомыми-вредителями на всей территории и 5-й Международный симпозиум по плодовым мушкам, имеющим экономическое значение, 28 мая – 5 июня 1998 г., Пенанг, Малайзия.

Carpenter

,

J. E.

,

S.

Bloem

и

F.

Marec

.

2005

.

Наследственное бесплодие насекомых,

с.

115

146

. In

V. A.

Dyck

,

J.

Hendrichs

,

A. S.

Robinson

(ред.),

Метод стерильных насекомых. Принципы и практика комплексной борьбы с вредителями на всей территории

.

Springer

,

Дордрехт, Нидерланды

.

Карпентер

,

Дж. Э.

,

С.

Блум

и

С.

Таггарт

.

2010

.

Влияние стратегии выращивания и гамма-излучения на плодовитость и плодовитость плодожорки Cydia pomonella (Linnaeus) (Lepidoptera: Tortricidae)

.

J. Appl. Энтомол

.

134

:

221

226

.

Калберт

,

Н.J.

,

J. R. L.

Gilles

и

J.

Bouyer

.

2019

.

Изучение влияния температуры охлаждения на выживаемость самцов Aedes aegypti и Aedes albopictus

.

PLoS One

.

14

:

e0221822

.

Демкович

,

М.

,

Дж. П.

Сигель

,

Б. С.

Хигби

, и

М. Р.

Беренбаум

.

2015

.

Механизм приобретения устойчивости и возможные связанные с этим затраты на приспособляемость Amyelois transitella (Lepidoptera: Pyralidae), подвергнутую воздействию инсектицидов-пиретроидов

.

Environ. Энтомол

.

44

:

855

863

.

Додд

,

Б.

и

Р. Дж.

Веттер

.

2009

.

Замена 137 Cs облучателей на рентгеновские

.

Физика здоровья

.

96

:

27

30

.

Doster

,

M. A.

и

T. J.

Michailides

.

1995

.

Связь между датой раскола скорлупы и гниением фисташковых орехов видами Aspergillus

.

Завод Dis

.

79

:

766

769

.

Doster

,

M. A.

и

T. J.

Michailides

.

1999

.

Взаимосвязь между изменением цвета скорлупы фисташковых орехов и частотой грибкового поражения и заражения насекомыми

.

Завод Dis

.

83

:

259

264

.

Dowell

R. V.

,

J.

Worley

и

P. J.

Gomes

.

2005

.

Поставка, появление и выпуск стерильных насекомых,

стр.

297

324

. В

В.A.

Dyck

,

J.

Hendrichs

и

A. S.

Robinson

(ред.),

Метод стерильных насекомых. Принципы и практика комплексной борьбы с вредителями на всей территории

.

Springer

,

Дордрехт, Нидерланды

.

Дайк

В. А.

,

Дж.

Хендрикс

,

А. С.

Робинсон

, (ред.)

2005

.

Техника стерильных насекомых. Принципы и практика комплексной борьбы с вредителями на всей территории

.

Springer

,

Дордрехт, Нидерланды

.

Follett

,

P. A

.

2006

.

Облучение в качестве альтернативы бромистому метилу для послеуборочной борьбы с Omphisa anastomosalis (Lepidoptera: Pyralidae) и Euscepes postfasciatus и Cylas formicarius elegulus (Coleoptera: Curculionidae) в сладком картофеле

.

J. Econ. Энтомол

.

99

:

32

37

.

Follett

,

P. A

.

2008

.

Влияние облучения на развитие и размножение мексиканских листоверток (Lepidoptera: Tortricidae)

.

J. Econ. Энтомол

.

101

:

710

715

.

Follett

,

P. A.

и

J. W.

Armstrong

.

2004

.

Пересмотренные дозы облучения для борьбы с бахчевой, средиземноморской плодовой мухой и восточной плодовой мухой (Diptera: Tephritidae) и общая доза для тефритидных плодовых мух

.

J. Econ. Энтомол

.

97

:

1254

1262

.

Follett

,

P.A.

и

K.

Snook

.

2012

.

Облучение для карантинной борьбы с инвазивной светло-коричневой яблочной моли (Lepidoptera: Tortricidae) и общая доза для яиц и личинок мучнистой черепахи

.

J. Econ. Энтомол

.

105

:

1971

1978

.

Гибсон

,

Б.W.

,

NC

Boles

,

GP

Souroullas

,

AJ

Herron

,

JK

Fraley

,

RS

Schwiebert 9000 Sharp

,

J

Гуделл

.

2015

.

Сравнение цезия-137 и рентгеновских облучателей с использованием реконструкции трансплантата костного мозга у мышей C57BL / 6J

.

Сост. Мед

.

65

:

165

172

.

Goodwin

,

J. A.

и

Madsen

,

H. F

.

1964

.

Поведение при спаривании и откладывании яиц пупочного червя, Paramyelois transitella (Walker)

.

Хильгардия

.

35

:

507

525

.

Haff

,

R. P.

,

E. S.

Jackson

,

J.

Gomez

,

D. L.

Light

,

P.A.

Follett

,

G. S.

Simmons

и

B. S.

Higbee

.

2016

.

Строительные облучатели на основе рентгеновских трубок

.

Radiat. Phys. Chem

.

121

:

43

49

.

Хейман

,

Г. З

.

1992

.

Базовая статистика для поведенческих наук: непараметрические процедуры для частотных данных и ранжированных данных.

Houghton Mifflin Company, Бостон, Массачусетс

.

Helinski

,

M. E.

,

A. G.

Parker

и

B. G.

Knols

.

2009

.

Радиационная биология комаров

.

Малар. J

.

8 Дополн. 2

:

S6

.

Hendrichs

J.

,

M. J. B.

Vreysen

,

W. R.

Enkerlin

и

J. P.

Cayol

.

2005

.

Стратегические варианты использования стерильных насекомых для комплексной борьбы с вредителями на всей территории,

стр.

563

600

. In

V. A.

Dyck

,

J.

Hendrichs

и

A. S.

Robinson

(ред.),

Метод стерильных насекомых. Принципы и практика комплексной борьбы с вредителями на всей территории

.

Springer

,

Дордрехт, Нидерланды

.

Higbee

,

B. S.

и

C. S.

Burks

.

2008

.

Влияние лечения нарушения спаривания на половое общение пупочного червя (Lepidoptera: Pyralidae) и повреждение миндаля и фисташек

.

J. Econ. Энтомол

.

101

:

1633

1642

.

Higbee

,

B. S.

и

J. P.

Siegel

.

2009

.

Новые стандарты санитарии пупка апельсинового червя могут уменьшить повреждение миндаля

.

Calif. Agr

.

63

:

24

28

.

Higbee

,

B. S.

и

J. P.

Siegel

.

2012

.

Полевая эффективность и сроки применения метоксифенозида, препарата с пониженным риском для борьбы с пупковыми оранжерейками (Lepidoptera: Pyralidae) на миндале

.

J. Econ. Энтомол

.

105

:

1702

1711

.

Higbee

,

B. S.

,

C. S.

Burks

и

R. T.

Cardé

.

2017

.

Нарушение спаривания пупочного червя (Lepidoptera: Pyralidae) с использованием широко расставленных аэрозольных распылителей: является ли смесь феромонов наиболее эффективным разрушающим средством?

J. Econ. Энтомол

.

110

:

2056

2061

.

Хилл

,

М. А

.

2004

.

Изменение биологической эффективности рентгеновских и гамма-лучей с энергией

.

Radiat. Prot. Дозиметрия

.

112

:

471

481

.

Husseiny

,

M. M.

и

H. F.

Madsen

.

1964

.

Стерилизация пупочного червя, Paramyelois transitella (Walker) гамма-облучением

.

Хильгардия

.

36

:

113

137

.

Камен

J.

,

W. Y.

Hsu

,

B.

Boswell

и

C.

Hill

.

2009

.

Успешный переход от радиоактивных облучателей к рентгеновским облучателям в одном из крупнейших медицинских центров США

.

Физика здоровья

.

117

:

558

570

.

Кирк

,

р.Е.

,

2009

.

Аппарат и способ облучения. Патент США 7,515,686

.

Классен

,

W

.

2005

.

Комплексная борьба с вредителями на всей территории и метод стерильных насекомых,

стр.

39

68

. In

V. A.

Dyck

,

J.

Hendrichs

и

A. S.

Robinson

(ред.),

Метод стерильных насекомых. Принципы и практика комплексной борьбы с вредителями на всей территории

.

Springer

,

Дордрехт, Нидерланды

.

Книплинг

,

E. F

.

1979

.

Основные принципы борьбы с насекомыми и борьбы с ними

.

Справочник по сельскому хозяйству 512; Министерство сельского хозяйства США, Служба сельскохозяйственных исследований

,

Вашингтон, округ Колумбия

.

Лян

,

П.

,

Р. П.

Хафф

,

И.

Овчинникова

,

Д.M.

Light

,

N. E.

Mahoney

и

J. H.

Kim

.

2019

.

Куркумин и кверцетин как потенциальные радиопротекторы и / или радиосенсибилизаторы для стерилизации на основе рентгеновских лучей самцов личинок пупочного червя

.

Sci. Репу

.

9

:

2016

. |

Лайт

,

Д. М.

,

И.

Овчинникова

,

Е. С.

Джексон

,

Р.П.

Хафф

.

2015

.

Влияние рентгеновского облучения на самцов пупочной моли (Lepidoptera: Pyralidae) на спаривание, плодовитость, плодовитость и наследственное бесплодие

.

J. Econ. Энтомол

.

108

:

2200

2212

.

Mastrangelo

,

T.

,

A. G.

Parker

,

A.

Jessup

,

R.

Pereira

,

D.

Orozco-Dávila

, A.

Islam

,

T.

Dammalage

и

J. M.

Walder

.

2010

.

Новое поколение рентгеновских облучателей для стерилизации насекомых

.

J. Econ. Энтомол

.

103

:

85

94

.

Mehta

,

K.

и

A.

Parker

.

2011

.

Характеристики и дозиметрия практической рентгеновской альтернативы самозащитным гамма-излучателям

.

Radiat. Phys. Chem

.

80

:

107

113

.

Новотный

,

Дж.

,

М.

Зубрик

.

2003

.

Метод стерильных насекомых как инструмент повышения эффективности биоконтроля непарного шелкопряда,

стр.

80

86

. In

M. L.

McManus

и

A. M.

Liebhold

(ред.), Труды: Экология, обследование и борьба с лесными насекомыми; 1–5 сентября 2002 г .; Краков, польша.Gen. Tech. Реп. NE-311. Ньютаун-сквер, Пенсильвания: Департамент сельского хозяйства США, Лесная служба, Северо-восточная исследовательская станция.

Sanderson

,

J. P.

,

M. M.

Barnes

,

R. R.

Youngman

и

C. E.

Engle

.

1989

.

Скорость развития пупочного червя (Lepidoptera: Pyralidae) при различных постоянных температурах

.

J. Econ. Энтом

.

82

:

1096

1100

.

Siegel

,

J. P.

,

M. M.

Strmiska

,

F. J.

Niederholzer

,

D. K.

Giles

и

S. S.

Walse

.

2018

.

Оценка покрытия инсектицидами миндаля и фисташек для борьбы с пупковыми оранжерейками ( Amyelois transitella ) (Lepidoptera: Pyralidae)

.

Pest Manag. Sci

.

75

:

1435

1442

.

Sinclair

,

B.J.

,

A.

Addo-Bediako

и

S. L.

Chown

.

2003

.

Изменчивость климата и эволюция морозостойкости насекомых

.

Biol. Преподобный Камб. Филос. Soc

.

78

:

181

195

.

Сосунок

,

D. M.

,

J. K.

Hackett

,

A.

Chhagan

,

A.

Barrington

и

A.М.

Эль-Сайед

.

2006

.

Влияние облучения на окрашенных самок яблонной моли Teia anartoides (Lep., Lymantriidae) стерильность и привлекательность для самцов

.

J. Appl. Энтомол

.

130

:

167

170

.

Wagner

,

J. K.

,

J. A.

Dillon

,

E. K.

Blythe

и

J. R.

Ford

.

2009

.

Дозовые характеристики рентгеновского облучателя rad sourceTM 2400 для пастеризации устриц

.

заявл. Radiat. Исот

.

67

:

334

339

.

Weiss

,

J.

,

A.O.

Allen

и

H.A.

Schwartz

.

1956

.

Использование дозиметра сульфата железа Фрике для доз гамма-излучения в диапазоне 4–40 кр

.

Женева. Proc. Internatl. Конф. Использование атомной энергии в мирных целях

14

:

179

181

.

Yamada

,

H.

,

A. G.

Parker

,

C. F.

Oliva

,

F.

Balestrino

и

J. R. L.

Gilles

.

2014

.

Рентгеновское бесплодие у Aedes albopictus (Diptera: Culicidae) и продолжительность жизни самцов после облучения

.

J. Med. Энтом

.

51

:

811

816

.

Опубликовано Oxford University Press от имени Энтомологического общества Америки 2020.

Эта работа написана (а) государственным служащим (ами) США и находится в общественном достоянии США.

Воспроизводимое изменение фенотипа из-за длительного охлаждения куколок бабочек Polyommatus icarus

Abstract

Исследованы фенотипические изменения, вызванные длительным охлаждением (2–12 недель при 5 ° C в темноте) свежеобразованных куколок Polyommatus icarus . Похолодание остановило имагинальное развитие куколок, собранных вскоре после трансформации личиночной стадии.После охлаждения куколкам позволяли продолжить цикл развития. Крылья закрытых образцов были исследованы с помощью оптической микроскопии, сканирующей и просвечивающей электронной микроскопии поперечного сечения, УФ-видимой спектроскопии и микроскопии. У взрослых особей были обнаружены фенотипические изменения, которые очень хорошо воспроизводили результаты, которые мы опубликовали ранее для небольших групп людей; эти изменения включали: i) линейное увеличение величины количественного отклонения от нормального рисунка вентральной части крыльев с увеличением времени охлаждения; ii) незначительное изменение синей окраски самцов; и iii) увеличение количества синих чешуек на спинной поверхности крыла самок с увеличением времени охлаждения.Несколько независимых факторов, включая неупорядоченность рядов регулярной чешуи у самцов, количество синих чешуек у самок, вероятность эклозии и вероятность бездефектной эклозии, показали, что время охлаждения можно разделить на три периода: 0–4 недели, 4 –8 недель и 8–12 недель, каждая из которых характеризуется определенными изменениями. Переход от коричневых женских чешуек к сначала синим чешуйкам с характерной для женщин формой, а затем к синим чешуйкам с характерной для мужчин формой с более длительным временем охлаждения предполагает медленное разложение вещества, определяющего образование чешуи.

Образец цитирования: Piszter G, Kertész K, Horváth ZE, Bálint Z, Biró LP (2019) Воспроизводимое изменение фенотипа из-за длительного охлаждения куколок бабочек Polyommatus icarus . PLoS ONE 14 (11): e0225388. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0225388

Редактор: Дж. Джо Халл, Служба сельскохозяйственных исследований Министерства сельского хозяйства США, США

Поступила: 14 мая 2019 г .; Принята к печати: 15 октября 2019 г .; Опубликовано: 25 ноября 2019 г.

Авторские права: © 2019 Piszter et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в рукописи и ее файлах с вспомогательной информацией.

Финансирование: Это исследование было поддержано Национальным бюро исследований, развития и инноваций Венгрии — грантами NKFIH K 111741 (LPB) и K 115724 (KK).Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Введение

Область интегративной биологии, объединяющая данные из различных «омических» дисциплин, быстро расширяется [1]. Особенно многообещающая комбинация — это геномика, связанная с феноменом [2]. Последний подход понимается как способ проследить причинно-следственные связи между генотипами, факторами окружающей среды и фенотипами.Этот тип анализа является сложной задачей, обычно связанной с обработкой многомерных наборов данных. В области здравоохранения и растениеводства часто проводятся сложные и дорогостоящие сбор и оценка данных [3–6]. Однако было трудно использовать эту стратегию в области интегративной биологии насекомых [7].

Фенотипическая пластичность описывает способность одного генотипа проявлять множество фенотипов, а также механизмы, которые переводят изменение окружающей среды в воспроизводимые фенотипические модификации [8].Если «фенотип» понимать в широком смысле, включая все аспекты организма, кроме генотипа, от ферментных продуктов генов до усвоенного поведения и «окружающей среды», включающей как внешнее окружение организма, так и внутренние условия влияет на экспрессию генов, «фенотипическая пластичность» охватывает огромное разнообразие видов изменчивости [9]. Следует различать фенотипическую пластичность и полифенизм, последний понимается как существование альтернативных фенотипов в популяции, обусловленных окружающей средой.Недавно была проведена комплексная работа по исследованию полифенизма и фенотипической пластичности у пяти родственных видов бабочек микалезин из тропиков Старого Света, проявляющих сезонный полифенизм. Например, различия между формой влажного и сухого сезонов Bicyclus anynana и многими другими микалезинами заключаются в цветовых узорах на вентральных поверхностях крыльев, тесно связанных с альтернативными сезонными стратегиями предотвращения хищничества. В лаборатории сезонные формы Б . anynana может быть индуцирован контролем температуры в критический период до взрослого развития [10].

Интересный момент сделан в фокусной статье, в которой экспериментально применяется IBM Watson к патологии: «Помните, что с точки зрения всей последовательности генома нет никакой разницы между гусеницей и бабочкой». [3]. В самом деле, несмотря на наличие различных структур тела, диеты, поведения, стратегий выживания и т. Д., Гусеница и бабочка представляют собой выражение одной и той же генетической информации.В определенном смысле их можно рассматривать как два разных фенотипа одной и той же генетической информации. Переключение между личиночной формой и имагинальной формой происходит в куколке, что для многих видов занимает лишь немногим больше одной недели. Более того, как кратко сформулировал Нийхаут: «При (генетическом) доминировании определенный фенотип может быть произведен несколькими разными генотипами. Неопределенность работает и в другом направлении: один генотип может давать множество различных фенотипов, в зависимости от различных непредвиденных обстоятельств, встречающихся во время развития.То есть фенотип является результатом сложной серии процессов развития, на которые влияют как факторы окружающей среды, так и гены »[11]. Стоит отметить, что у насекомых с полным метаморфозом (в частности, у бабочек) существует возможность вызвать видоспецифические изменения на стадии куколки — когда происходит трансформация личинки в воображаемую — в четко определенное время развития [12 –14]. Некоторые из этих фенотипических изменений, вызванных целевым вмешательством, можно увидеть невооруженным глазом.Например, мы недавно показали, что для бабочек Polyommatus icarus (как самцов, так и самок) степень индуцированных фенотипических изменений в пигментных рисунках на брюшной поверхности крыла пропорциональна продолжительности охлаждения, применяемого к куколке сразу после окукливание [14].

Мы также обнаружили, что синяя структурная окраска дорсальной поверхности крыла P . Самцы icarus показали гораздо меньшую величину изменений при охлаждении, чем пигментированный узор на вентральных поверхностях крыльев [14].Наблюдаемое изменение не было пропорционально продолжительности охлаждения, что указывает на то, что стресс выявил только скрытые генетические вариации [15,16]. В отличие от цветов на основе пигментов, структурные цвета возникают в результате взаимодействия между наноархитектурой на основе хитина в чешуе крыла и электромагнитным излучением [17]. Эти наноархитектуры самоорганизуются во время образования накипи. Несмотря на некоторое понимание этих специальных наноархитектур [18–22], их образование еще не полностью изучено, равно как и механизм, который вызывает P . icarus самцы демонстрируют структурно окрашенные синие чешуйки спинного покрова, в то время как самки демонстрируют коричневые чешуйки спинного покрова, окрашенные пигментом.

В случае структурных цветов характерные размеры — в диапазоне десятков нанометров — и периодичность наноархитектуры определяют, какие диапазоны длин волн не могут распространяться в наноструктуре и отражаются в направлении глаза наблюдателя [17]. Изменение характерных наноструктур в диапазоне нескольких десятков нанометров может привести к значительному смещению максимума спектрального отражения [23].

Удивительно, но охлаждение все P . Самки icarus имеют ряд синих чешуек, структура просвета которых аналогична структуре просвета самцов [14]. Количество этих чешуек варьируется от человека к человеку, при этом общая тенденция к более длительному охлаждению приводит к увеличению количества синих чешуек. В естественных популяциях Центральной Европы самки демонстрируют коричневую окраску на основе пигмента на спинной поверхности крыла, а частота появления голубоватых самок в музейных коллекциях обычно ниже 10% [14].Здесь нужно учитывать, что коллекционеры обычно оставляют «необычных» особей; поэтому в этих коллекциях преобладают голубоватые самки.

Как подробно описано Houle et al. [2], множественные способы, которыми генотипическая информация влияет на фенотип организма, могут быть лучше всего представлены на карте генотип-фенотип (G-P) (вставка 1 в [2]). Этот подход восходит к работе Ричарда Левонтина, утверждающей, что эволюция происходит в пространстве всех возможных генотипов (пространство G) и пространстве всех возможных фенотипов (пространство P) [24].Центральным моментом при таком подходе является разложение эволюции на два процесса, происходящих в двух различных «пространствах»: пространстве G и пространстве P. Есть четыре ключевых компонента этого эволюционного процесса: (1) эпигенетический процесс генерирует фенотип с использованием генотипической информации; (2) естественный отбор действует в P-пространстве, чтобы сместить средний фенотип родителей от среднего фенотипа всех индивидуумов; (3) личность успешных родителей определяет, какие генотипы сохраняются; и (4) генетические процессы, такие как мутации и рекомбинация, изменяют положение в пространстве G [2].Убедительными примерами этого процесса являются многочисленные разновидности фруктов, таких как яблоки, а также собаки, кошки и другие домашние животные, которые были созданы путем целенаправленного отбора людей из практически одних и тех же генотипов, что было достигнуто только в последних двух. тысячу лет во многих случаях.

При описанном выше подходе возникает соблазн изучить, может ли данный «фактор окружающей среды», такой как длительное охлаждение куколок, иметь воспроизводимые эффекты на результирующие фенотипы определенного генотипа.Наш тестовый вид бабочки, P . icarus , особенно хорошо подходит для этого типа экспериментов, поскольку синяя структурная окраска на поверхности спинного крыла этого вида, используемого для сексуального общения [23], демонстрирует высокую степень стабильности [14,25], в то время как изменение цвета пигментный рисунок на брюшной поверхности крыла демонстрирует довольно линейную зависимость от продолжительности охлаждения при 5 ° C, которому подвергаются свежеобразованные куколки. Поэтому мы повторили наши предыдущие эксперименты по охлаждению с использованием 200 куколок, полученных от 220 личинок, выращенных в контролируемых условиях, как описано ранее [14].

Для получения дополнительной информации о фенотипической модификации, вызванной длительным охлаждением только что сформированных куколок P . icarus butterflies [14] мы хотели ответить на ряд вопросов:

  • Линейная зависимость и наклон, количественно характеризующие величину изменений формы брюшных крыльев в зависимости от времени охлаждения, одинаковы между разными экспериментами?
  • Наши предыдущие результаты показали, что гены, управляющие производством фотонной наноархитектуры, ответственной за синюю окраску дорсальной поверхности крыла самцов, должны присутствовать в геномах обоих полов [14].Связано с этим: если все предки происходят из одной и той же популяции и были собраны в одно и то же время, насколько велико отклонение в положении максимумов синего отражения у самок с индуцированной синей окраской?
  • Существует ли ограничение на количество коричневых пигментированных чешуек, преобразованных в синий цвет с помощью наноархитектур, или возможно преобразование большей части или всех? Этот процесс преобразования подразумевает фундаментальную модификацию клеточных процессов, поскольку два механизма окраски радикально различаются.
  • Общее происхождение и количество выращенных личинок вместе были достаточны, чтобы позволить исследовать родство замкнутых особей и особей, замкнутых с дефектами. В нашей предыдущей работе этот аспект не обсуждался.

Мы обнаружили, что изменение пигментного рисунка брюшных крыльев, вызванное контролируемым охлаждением, демонстрирует чрезвычайно высокую степень воспроизводимости. Кроме того, синяя окраска спинных крыльев охлажденных самок показывает значительно большее отклонение от цвета диких самцов, чем спектральное отклонение охлажденных самцов.Доля бабочек, вылетевших из охлажденных куколок с дефектами после прекращения охлаждения, указывала на три стадии в продолжительности охлаждения: от 0 до 4 недель, от 4 до 8 недель и от 8 до 12 недель. Изменения в расположении чешуек и микронной морфологии синих чешуек у самок подтверждают такое разделение времени охлаждения на три стадии.

Материалы и методы

Отлов и кладка яиц

Дикий первенец P . икаров Ранней весной 2016 г. в окрестностях города Эрд (Венгрия) было отловлено особей (47 ° 22´35,947˝N 18 ° 51´18,55˝E). Вид P . icarus не подлежит никаким ограничениям в Венгрии. Все образцы были собраны на государственной земле, которая никак не охранялась и для которой не требовалось никаких специальных разрешений. Мы поместили трех самок и трех самцов в клетки, содержащие смесь кормовых растений для этих личинок ( Trifolium pratense , Trifolium repens и Medicago sativa ).Клетки были расположены в среде садового типа, как сообщалось ранее [14]. Изумленных кормили водно-сахарным раствором. Внутри вольеров наблюдали спаривание самок и самцов. Самки откладывали яйца на кормовые растения в клетке, проявляя сильное предпочтение M . sativa в самых солнечных местах клетки. Срок откладки яиц составлял 10–14 дней.

Выращивание личинок в клетках и в лаборатории

После вылупления из яиц маленьким личинкам позволяли свободно питаться в клетке до тех пор, пока состояние кормовых растений не начало ухудшаться ускоренными темпами.На этом этапе растения были срезаны близко к поверхности земли и доставлены в лабораторию, где были собраны личинки. Личинки находились на разных стадиях развития в зависимости от времени, когда было отложено яйцо. Каждую личинку помещали в отдельную чашку Петри, которую ежедневно очищали, а личинке давали свежие листья пищевых растений. Личинок кормили до тех пор, пока не наблюдалась характерная стадия предкуколки, обычно за один-два дня до окукливания. После окукливания свежеобразованные куколки переносили в чистые чашки Петри с листьями растений (для стабилизации влажности), которые затем помещали в холодильник в темноте с постоянной температурой 5 ° C.

Охлаждение после окукливания

Стадия развития сразу после окукливания хорошо определена и поэтому была выбрана в качестве отправной точки для охлаждения. Продолжительность охлаждения задавалась на основании предыдущих экспериментов [14]. Было выбрано шесть периодов охлаждения: 2 недели, 4 недели, 6 недель, 8 недель, 10 недель и 12 недель. Для каждого периода охлаждения использовалась группа из 30 куколок, и несколько кукол оставляли в резерве на те случаи, когда охлажденная куколка по каким-то причинам не выдерживала охлаждения.Чаще всего в этих случаях участвовали куколки, которые были собраны слишком поздно после окукливания, у которых выработка экдизона достигала порога [11,26], при котором развитие куколки не могло быть остановлено, даже при помещении в холодильник для охлаждения до 5 ° C. .

Возобновление куколочного развития после длительного охлаждения

При отсутствии охлаждения P . Куколки icarus постепенно меняют окраску с зеленого на светло-желтый, темно-желтый, светло-коричневый и, наконец, темно-коричневый в течение 8–10 дней.За день до эклозии, когда кутикула куколки затвердевает и становится прозрачной, в большинстве случаев внутри куколки уже можно наблюдать синюю окраску самцов и оранжевые пятна на спинных передних крыльях самок.

По истечении запланированного времени охлаждения куколки вынимали из холодильника и помещали в лабораторию в закрытые прозрачные пластиковые ящики, которые позволяли выдерживать нормальные условия дневного света. Уровень влажности в боксах регулировался по свободной поверхности воды.Куколки были изолированы от емкости с водой с помощью сети, которая также использовалась, чтобы позволить замкнутым бабочкам подняться на верхнюю часть коробки, чтобы расправить крылья. Взрослые бабочки, которые успешно вылупились, вылупились через 8–10 дней после извлечения куколок из холодильника.

Одиночная группа охлажденных бабочек, в которой бабочки охлаждались в течение 4 недель, лечилась по-другому. В этом случае бокс, в котором проводилось постохлаждающее развитие куколок, был помещен далеко от окон, где в дневное время обеспечивалось только слабое освещение, чтобы проверить влияние световых условий на развитие куколок.

Физическая оценка

Фотография обеих поверхностей крыла.

Фотографии сделаны цифровой камерой Canon EOS 5D Mark III (Токио, Япония). Чтобы обеспечить правильное сравнение, мы использовали одинаковые условия освещения, используя один и тот же галогенный источник света на каждом изображении.

Микрофотография крыльев и единичных чешуек.

Микрофотографии крыльев в отраженном свете и чешуек в отраженном и проходящем свете получали с помощью микроскопа Zeiss AxioImager A1 (Йена, Германия) с присоединенной цифровой камерой.

Измерение спектров на единичных шкалах, снятых с крыльев.

Коэффициент пропускания и отражения в диапазоне длин волн 400–700 нм измеряли на отдельных шкалах с помощью спектрометра Avantes Avaspec-HS1024 TEC (Апелдорн, Нидерланды), присоединенного к микроскопу Zeiss AxioImager A1. Шкалы помещали на стеклянные предметные стекла микроскопа, которые также служили ориентиром при вычислении пропорций отраженного и проходящего света.

Спектральные измерения на спинной поверхности крыла и положение максимумов отражательной способности.

Спектральные измерения проводились с использованием дейтериево-галогенного источника света Avantes (AvaLight DH-S-BAL) и модульного спектрофотометра Avantes Avaspec-HS1024 TEC UV-VIS-NIR. Эта установка обеспечивала освещение и позволяла детектировать в диапазоне длин волн 200–1100 нм. Сбор отраженного света производился с помощью интегрирующей сферы, где пятно диаметром 5 мм освещалось перпендикулярно поверхности крыла и собирался свет, отраженный под всеми углами к верхней полусфере [25].Во всех измерениях в качестве эталона использовалась белая диффузная стандартная плитка (Avantes WS-2). Для некоторых образцов были также проведены спектральные измерения при нормальном падении. В этом случае использовался датчик отражения нормального падения Avantes (Avantes FCR-7UV200-2-ME-SR), в котором освещающие и обнаруживающие оптические волокна были объединены в один датчик, что позволило нам обнаруживать перпендикулярно отраженный свет от источника поверхность крыла.

В образцах, в которых было обнаружено достаточное количество синих чешуек, можно было наблюдать значительный пик в ближнем УФ-синем диапазоне длин волн.Для дальнейшего анализа эти пики были охарактеризованы с помощью программного обеспечения OriginLab Origin 2018 (Нортгемптон, Массачусетс, США), и были определены значения длины волны и интенсивности пиков.

Электронная микроскопия.

Сканирующую электронную микроскопию (СЭМ) проводили с использованием микроскопа LEO 1540XB (Zeiss GMBH, Jena, Germany). Крылья бабочки были разрезаны на куски размером несколько миллиметров 2 , которые затем были прикреплены к держателю образца, который позволил нам исследовать желаемые области поверхностей крыла.Для сохранения исходного состояния наноархитектуры крыла мы не наносили металлическое покрытие.

Просвечивающая электронная микроскопия (ПЭМ) предшествовала подготовке образцов. После фиксации (45 мин в 2,5% глутаровом альдегиде и 2% формальдегиде в 0,1 М Na-какодилатном буфере (pH 7,2)) и дегидратации (в серии градуированных этанолов (50–100% с шагом 10%)) несколько миллиметров крылышек были залиты смолой Spurr (SPI Supplies, West Chester, PA, USA) и окрашивали уранилацетатом и цитратом свинца для повышения контрастности полученных изображений.С помощью ультрамикротома нарезали срезы толщиной 70 нм и помещали на ПЭМ-микросетки. Полученные таким образом образцы исследовали с помощью микроскопа Philips CM20 (Philips, Эйндховен, Нидерланды) при ускоряющем напряжении 200 кэВ.

Толщину хитинового и воздушного слоев измеряли на изображениях ПЭМ с помощью программы CorelDRAW X6 (Corel, Оттава, Онтарио, Канада). СЭМ-изображения были проанализированы с использованием нашего специально разработанного программного обеспечения BioPhot Analyzer 2.0 [27], которое позволило нам извлечь структурные параметры исследуемых структур типа «перец-горшок».

Оценка изменений рисунка на брюшной поверхности крыла.

Брюшные стороны поверхностей крыльев самцов и самок демонстрируют сходную сложную пигментацию, состоящую из базальных, медиальных, постмедиальных и субмаргинальных рисунков из черных пятен с белыми кольцами и субмаргинальных оранжевых лунул, которые типичны для субтрибы Polyommatina. Можно присвоить числовое значение любому отклонению от стандартной модели, наблюдаемой у нормальных людей, что позволяет количественно оценить степень аберрации.Мы квалифицировали и закодировали размер крыла, окраску и рисунок брюшной поверхности крыла по сравнению с особями контрольной группы в качестве стандарта. Численные значения аберраций были усреднены для бабочек, выделенных из куколок, охлаждаемых в течение того же количества дней. Процедура количественной оценки подробно описана в [14].

Статистический анализ.

Статистический анализ проводился с использованием программного обеспечения Origin 2018 (OriginLab, Northampton, MA, USA).Необработанные данные образцов оценивали с использованием однофакторного дисперсионного анализа, дополненного апостериорным тестом Тьюки. Для сравнения линейных регрессий был проведен F-тест.

Результаты

Воспроизводимость изменений пигментного рисунка, вызванных охлаждением

Результаты двух серий экспериментов по охлаждению — результаты, опубликованные ранее [14], и результаты настоящей работы, проведенных на свежеобразованных куколках P . Бабочки icarus показаны на рис.1.Сравнение двух графиков, представленных на рис. 1, показывает высокую степень воспроизводимости результатов. Статистический анализ не показал значительных различий между двумя наборами данных (F-тест, p = 0,0971) (S1, рис.). Кроме того, второй набор экспериментов характеризуется гораздо меньшими ошибками, чем первый набор. Это различие может быть связано с предшественниками, происходящими из одной и той же популяции, и большим количеством куколок, используемых для каждого времени охлаждения во второй серии экспериментов.

Рис. 1. Количественная оценка аберрации пигментного рисунка на вентральных поверхностях крыла P . икар бабочки.

(A) Ранее опубликованные результаты [14]; (B) результаты серии экспериментов по охлаждению, проведенных для проверки воспроизводимости. Вертикальные полосы в каждой точке данных показывают величину фенотипических различий между людьми в группе, охлаждаемой в течение заданного времени. (s.e.m. = стандартная ошибка среднего).

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0225388.g001

S2 На рис. показаны некоторые куколки после 10 недель охлаждения, внешний вид которых не отличается от внешнего вида только что сформированных куколок. Таким образом, эти куколки еще не претерпели типичных изменений окраски, которые можно наблюдать во время куколочного развития. Это указывает на то, что их развитие действительно было «заморожено» на стадии после окукливания. Когда охлажденные куколки доводили до комнатной температуры, они следовали нормальной последовательности изменения цвета от желтовато-зеленого до желтого, коричневого и, наконец, синего у самцов или темно-коричневого у самок.Синяя окраска куколок самцов обычно наблюдается за день до эклозии. Его присутствие указывает на то, что фотонная наноархитектура сформировалась в чешуях, и что наноплоски внутри этой архитектуры заполнены воздухом. Если бы они были заполнены жидкостью тела или даже чистой водой, структурный цвет не был бы виден, так как контраст показателя преломления между хитином (n = 1,56) и водой (n = 1,33) был бы недостаточным [28].

На рис. 2 показаны четыре дорсальные и четыре вентральные поверхности крыла самца P . icarus бабочки, выделенные из куколок, содержащихся в клетках в саду, и позволили завершить там свою трансформацию; для куколок, подвергшихся трансформации в лаборатории без охлаждения; а для куколок — после 2 или 10 недель охлаждения. В то время как структурная синяя окраска самцов показывает небольшие изменения после 10 недель охлаждения (в основном, в насыщенности синего цвета), рисунок на основе пигмента полностью утратил почти все характерные элементы вида, некоторые из которых все еще наблюдаются после 6 недель охлаждения.

Рис. 2. Дорсальная и вентральная поверхности крыла P . икар самцов.

(A, C) Особи, выращенные в клетке; (B, D) выращены в лаборатории без охлаждения; или выращиваются с охлаждением куколок в течение (E, G) 2 недель или (F, H) 10 недель.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0225388.g002

Индивидуальные вариации смены рисунка

В то время как изменения среднего вентрального рисунка за определенное время охлаждения демонстрируют хорошую воспроизводимость между экспериментами, проведенными в разные годы, могут быть различия внутри группы индивидуумов, охлаждаемых в течение определенного времени.Чтобы проиллюстрировать это, мы выбрали группу, охлаждаемую в течение 6 недель, потому что она демонстрировала наибольшую величину различий между особями и состояла из трех самцов и девяти самок, соединенных таким образом, чтобы можно было оценить их крылья. На S3 Fig можно увидеть, что изменения можно условно разделить на две группы: первая группа похожа на то, что показано на рисунке 2, с видимыми только следами типичного рисунка краев крыла, а вторая группа похож на то, что показано на Рис. 1L и Рис. 1P [14], с некоторыми черными постмедиальными пятнами, окруженными белыми ореолами.Из девяти особей женского пола три принадлежат ко второй группе и шесть — к первой.

Увеличение продолжительности периода охлаждения привело к сдвигу в сторону особей, у которых большинство элементов пигментного рисунка на брюшной поверхности крыла были потеряны, как видно на примере самца на рис. 2, подвергнутого 10-недельному охлаждению. Фактически, после 10 недель охлаждения все особи, которые закрылись крыльями, позволяя оценить рисунок, демонстрировали этот тип чрезмерно редуцированного рисунка.

Все охлажденные самки, начиная с тех, которые подверглись 2-недельному охлаждению (т.е. все 16 особей), имели несколько синих чешуек, но количество синих чешуек варьировалось от нескольких до многих, как показано на S4 Рис.

Постепенные изменения при увеличении времени охлаждения можно наблюдать на оптических микрофотографиях, представленных на рис. 3. Морфологические изменения чешуек спинного крыла самок после 4 и 8 недель охлаждения представлены на рис. 4.

Рис 3.Изменения чешуи спинного крыла P . icarus образцы с увеличивающимся временем охлаждения, как видно под оптическим микроскопом.

(А) Самцы и (Б) самки. Вставка в верхнем левом углу (A) показывает андроконий, разделяющий правильные ряды синих покровных чешуек.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0225388.g003

Вариация окраски отдельных крыльев может быть лучше всего представлена ​​с помощью спектрального положения синего максимума, измеренного на спинных поверхностях крыльев.В этот анализ были включены все самцы, крылья которых были достаточно плоскими, чтобы можно было проводить спектральные измерения, в то время как были включены только те самки, которые демонстрировали достаточное количество синих шкал, позволяющих однозначно определить максимум отражательной способности. Результаты показаны на рис. 5. По возможности, все четыре крыла были подвергнуты измерениям и представлены на рисунке как отдельные объекты. Макроскопический цвет крыла является результатом среднего цвета микроскопических чешуек, поэтому каждое крыло рассматривается как отдельный оптический объект.В некоторых случаях смятие крыльев после взрыва не позволяло измерить все четыре крыла.

Рис. 5. Спектральное положение синего максимума, измеренное на крыльях P . icarus бабочки, выделенные из остывших куколок.

Сплошные линии нарисованы в соответствии с линейной аппроксимацией черных (красных) символов.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0225388.g005

Как показано на рис. 5, с увеличением времени охлаждения куколок черные символы вокруг линии, проведенной в соответствии с линейной аппроксимацией Спектральное положение синих максимумов самцов демонстрирует лишь умеренное отклонение (покрывающее только 10 нм), включая группу 6-недельного охлаждения, а непрерывная линия лишь очень незначительно отклоняется от горизонтальной линии, определяемой дикими и неохлаждаемыми самцами. .С другой стороны, синяя окраска самок показывает увеличенное отклонение уже через 2 недели охлаждения (покрывая 35 нм), а непрерывная красная линия на рис.5 значительно отклоняется (F-тест, p = 0,00492) от таковой у самцы (черная линия).

Ящичковые диаграммы максимальной длины волны дорсальной синей окраски, измеренные у неохлаждаемых самцов, охлажденных самцов и охлажденных самок в двух экспериментах, проведенных в 2011–2015 и 2016 годах, показаны на рис. 6. Два графика (n 2011- 2015 = 27, n 2016 = 64) демонстрируют поразительное сходство в отношении средних значений, стандартных ошибок и отклонений.Был проведен однофакторный дисперсионный анализ ANOVA, который показал значительные различия между средними значениями для неохлаждаемых самцов, охлажденных самцов и охлажденных самок в обоих экспериментах (p <0,05), что было подтверждено апостериорным тестом Тьюки для всех пар.

Рис. 6. Ящичковые диаграммы максимальной длины волны дорсальной синей окраски, измеренной на P . icarus неохлаждаемые самцы, охлажденные самцы и охлажденные самки двух экспериментов.

Показаны эксперименты (A) 2011–2015 гг. И (B) 2016 г.Однофакторный дисперсионный анализ ANOVA показал значимые различия между средними значениями (p <0,05), а апостериорный тест Тьюки показал значимые различия между всеми тремя группами образцов.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0225388.g006

Мы подробно исследовали индивидуальные различия между самцами, закрытыми после 8 недель охлаждения. Мужчины №81 и №86 были отобраны, потому что они демонстрировали наибольшие различия в спектральном положении их максимумов синего отражения, которые составляли 388 нм для мужчины № 86 и 416 нм для мужчины № 81.Оптические микрофотографии спинных задних крыльев и отдельных чешуек крыльев двух самцов показаны на рис. 7.

Рис. 7. Оптические микрофотографии спинных задних крыльев и отдельных чешуек P . icarus самцы №81 и №86.

Микрофотографии были получены строго при тех же условиях освещения и увеличения. (A) Дорсальное заднее крыло № 81 в отраженном свете; (B) заднее заднее крыло №86 в отраженном свете (C) чешуйки крыльев №81 в отраженном свете; (D) # 86 чешуйки крыла в отраженном свете; (E) # 81 чешуя на крыльях в проходящем свете; (F) # 86 чешуйки крыла в проходящем свете.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0225388.g007

Вентральные поверхности крыльев этих двух самцов также имели значительные различия, которые показаны на рис. S5. Рисунок крыльев аналогичен представленным. в S3 Фиг.

Спектры отражения, измеренные как интегрирующей сферой, так и датчиком нормального падения, выявили явные различия в спектрах двух самцов, когда измерения проводились на целых крыльях (рис. 8A и 8B) или на отдельных масштабах с использованием микроспектрофотометра (рис. 8C). и 8D).В последнем случае необходимо учитывать, что ограниченное пропускание оптических элементов под стандартным оптическим микроскопом искажает измерения в УФ-диапазоне. Однако искажение одинаково для двух сэмплов, поэтому различия между сэмплами можно эффективно выявить.

Рис. 8. Спектры отражения P . icarus , самцы №81 и №86, измерения на всех крыльях с (A) интегрирующей сферой и (B) датчиком нормального падения; (C) спектры отражения и (D) пропускания отдельных чешуек этих образцов, измеренные с помощью микроспектрофотометра.

На (A) пунктирная синяя линия показывает спектр, полученный в результате усреднения коэффициента отражения 7 неохлаждаемых образцов. Усредненные спектры (n = 4), измеренные с помощью микроспектрофотометра в отдельных шкалах, показанных на фиг. 7: (C) отраженный свет; (D) проходящий свет.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0225388.g008

На рис. 8A и 8B отражательную способность двух самцов, охлажденных в течение 8 недель, можно сравнить со спектром, полученным в результате усреднения отражательной способности самцов от того же эксперимент, который произошел от куколок, не подвергавшихся охлаждению.Можно заметить, что отражательная способность самца № 86 и средняя отражательная способность неохлаждаемых самцов почти совпадают в синем диапазоне, в то время как самец № 81 имеет заметно другую форму.

СЭМ

и изображения поперечного сечения чешуи самцов № 81 и № 86 показаны на рис. 9. Детальный структурный анализ наноархитектуры чешуек крыла двух образцов был проведен на основе 10 снимков СЭМ и 6 изображений ПЭМ. Было обнаружено, что существуют небольшие, но характерные различия между толщиной слоев многослойных структур (таблица S1), а статистически значимые различия были обнаружены с помощью однофакторного дисперсионного анализа (p <0.001) между средними диаметрами перфорированных отверстий для воздуха в фотонной структуре, что может привести к спектральным различиям двух образцов. На рис. 9E и 9F показаны прямоугольные диаграммы и исходные данные диаметров воздушных отверстий, измеренных на изображениях фотонных наноархитектур, полученных с помощью SEM.

Рис. 9. СЭМ, изображения поперечного сечения ПЭМ и размеры отверстий, измеренные на масштабах крыла P . icarus самцов вышли из куколок охлажденными в течение 8 недель.

Генерирующие цвет фотонные наноархитектуры мужчины № 81 (A, C); (B, D) самец № 86 можно увидеть на (A, B) SEM и (C, D).Изображения ПЭМ. (E) показаны прямоугольные диаграммы и (F) необработанные данные структурного анализа. Однофакторный дисперсионный анализ показал значительные различия (p <0,001) между диаметрами отверстий в фотонных наноархитектурах двух образцов.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0225388.g009

Доля эклозий и дефектов в зависимости от времени охлаждения

Увеличение времени охлаждения привело к снижению вероятности бездефектной эклозии.Бездефектная эклозия означает, что все четыре крыла сформировались и распространились регулярно.

Фракция замкнутых особей рассчитывалась как отношение замкнутых особей к общему количеству куколок, охлажденных в течение определенного времени (30 куколок за каждый период охлаждения) в настоящем исследовании. Долю с дефектами рассчитывали как отношение количества неидеально замкнутых особей к общему количеству замкнутых особей.

Как показано на Рис. 10, замкнутая фракция и фракция с дефектами показали различия в зависимости от времени охлаждения: хотя две недели охлаждения не привели к уменьшению замкнутой фракции, это время охлаждения привело к появлению нескольких замкнутых бабочек с дефектами (11 бабочек из 30 куколок), чаще всего в виде неидеально расправленных крыльев.Форма черной пунктирной линии указывает на то, что замкнутая фракция начала резко уменьшаться между 4 и 6 неделями охлаждения, в то время как количество замкнутых образцов, но с дефектами, показало плато между 4 и 10 неделями охлаждения. После 12 недель охлаждения бездефектных эклозий не наблюдалось.

Рис. 10. Доля замкнутых (зеленая линия) P . icarus бабочки и бабочки, покрытые дефектами (синяя линия) в зависимости от времени охлаждения, приложенного к куколкам.

Пунктирные черные и красные линии были нарисованы для направления взгляда. Куколкам, которые охлаждали в течение 4 недель, позволяли возобновить развитие после охлаждения в условиях низкой освещенности.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0225388.g010

Из формы зеленой кривой на Рис. 10 следует, что условия низкой освещенности во время возобновления развития куколки очень пагубно сказывались на количестве замкнулись бабочки (12 образов из 30 куколок) и, вероятно, немного увеличили долю особей, которые замкнулись с дефектами (8 из 12 особей).На рис. S6 можно увидеть, что куколки, которые охлаждались в течение 4 недель и не смогли достичь эклозии, претерпели ожидаемые изменения цвета с зеленого на коричневый (как подробно описано выше), но не смогли завершить цикл развития.

Как показано на рис. 1В, условия низкой освещенности, по-видимому, также вызывают отклонение точки, в которой рисунок на основе пигмента на брюшной поверхности крыла отклоняется от общей тенденции, определяемой другими точками, определенными в экспериментах, в течение которых нормальный дневной свет, но не прямой солнечный свет, во время возобновления куколочного развития.

Появление куколок, запоздалых в холодильнике

Те куколки, которые подверглись охлаждению после достижения порога экдистероидов (т. Е. Прошло слишком много времени между формированием куколки и началом охлаждения в темноте), продолжали свое развитие, несмотря на температуру 5 ° C и непрерывную темноту. окружающая среда — хотя и гораздо более медленными темпами, чем в естественных условиях — и достигла различных стадий безуспешного шелушения. Даже в этих условиях эти особи достигли взрослой стадии и предприняли попытку эклозии.Однако среди этих людей не было обнаружено ни одного человека без дефектов; некоторые примеры показаны на рис. S7. Их развитие до эклозии заняло примерно 7 недель вместо обычных 8–10 дней. Развитие куколок, у которых охлаждение начиналось до достижения этого порога, могло быть приостановлено на срок до 10 недель, при этом еще происходило несколько успешных эклозий. Нормальная продолжительность окукливания у Р . icarus , в зависимости от условий окружающей среды, составляет от 7 до 14 суток.

Обсуждение

Полифенизмы — это дискретные альтернативные фенотипы, которые развиваются в ответ на специфические сигналы из окружающей среды [10,29]. В естественных условиях разные фенотипы обычно развиваются в разные периоды года и вызваны различиями в фотопериоде, температуре или питании [30]. Переход от одного фенотипа к другому опосредуется гормоном развития [31]. Основными гормонами, контролирующими полифеническое развитие, являются те же гормоны, которые контролируют линьку и метаморфоз, а именно экдизон и ювенильный гормон.Внешние характеристики насекомых основаны на их кутикуле; следовательно, для выражения полифенизма необходима линька, а альтернативный фенотип выражается в новой кутикуле, которая синтезируется во время линьки. Перед этой линькой есть один или несколько относительно коротких периодов, в течение которых гормоны могут изменить ход последующего развития. Они называются критическими периодами или периодами, чувствительными к гормонам, и задействованные механизмы действуют по существу как бинарные переключатели, при этом альтернативные пути развития выбираются в зависимости от того, находится ли гормон выше или ниже порогового значения [28,30].Большинство известных случаев полифенического переключения путей развития является результатом вызванных окружающей средой изменений в сроках секреции гормонов, времени гормоночувствительного периода или пороге чувствительности к гормонам [32]. Некоторые другие механизмы также были предложены совсем недавно [33].

Изменения пигментного рисунка, вызванные охлаждением

Искусственные условия, применявшиеся в наших экспериментах (т.е. необычно большая продолжительность холодного периода и отсутствие света), соответствовали неприродным условиям, которые обычно не встречаются для P . icarus во время своего развития, так как этот вид приспосабливается к более прохладному климату, сокращая количество выводков до одного в северных регионах [34]. Самая короткая продолжительность охлаждения (две недели) вызывала относительно незначительные изменения в пигментном паттерне (см. Рис. 2) и не снижала вероятность эклозии, но увеличивала количество особей, которые не были в идеальном состоянии, почти до 40% . Эти изменения могут быть связаны с нарушением последовательности синтеза гормона сразу после окукливания.Относительно хорошая переносимость двухнедельного охлаждения может указывать на то, что периоды такой продолжительности, когда климатические условия неблагоприятны, могут быть испытаны первым выводком P . icarus весной время от времени в естественных местообитаниях. С другой стороны, более продолжительное время охлаждения в пять раз, составляющее 10 недель, привело к резким изменениям рисунка брюшных крыльев, в то время как структурный цвет дорсальной поверхности крыла самцов практически не изменился. Некоторое наблюдаемое разупорядочение расположения шкалы (рис. 3) будет обсуждаться более подробно ниже.

Примечательно, что не все процессы синтеза пигментов были затронуты одинаково. И самки, и самцы демонстрировали относительно неизмененный «фоновый цвет» на брюшных поверхностях крыльев, как показано на рис. 2. Изменения оттенка этого фонового цвета были почти незначительными по сравнению с изменениями характерного рисунка точек. Более того, половые различия в этой окраске сохранились, так как самцы имели более серый фоновый цвет, в то время как самки имели несколько более коричневую окраску на брюшном крыле.С другой стороны, исчезли небольшие черные пятна, окруженные белыми кольцами, типичные для постбазальной и постмедиальной областей. Коричневая окраска на дорсальной поверхности крыла самок сохранилась в значительной степени, подобно тому, что показано на рис. 1 в [14]. Примечательно, что не все мелкие черные черты исчезли. Даже после 10 недель охлаждения дискальные линии все еще присутствовали на брюшных поверхностях крыльев, как показано на рис. 2.

Высокая степень воспроизводимости средних изменений в элементах рисунка брюшной части крыла (Рис. 1) удивительна и указывает на то, что такие эксперименты могут пролить свет на механизмы, управляющие формированием этих рисунков.Однако в группе, охлаждаемой в течение определенного времени, можно встретить особей с различной степенью изменений в строении их брюшных крыльев; эти различия могут быть предварительно связаны с генетическими различиями. Как показано на рис. S3, наблюдались две отдельные группы: одна, в которой охлаждение (в течение 6 недель) вызывало большие изменения в вентральном паттерне (бабочки 2, 3, 5, 7, 8, 9, 10, 11 и 12) и другая группа, в которой рисунок практически не изменился (бабочки 1, 4 и 6).Для выявления причин этих различий могут потребоваться дальнейшие генетические исследования. Стоит подчеркнуть, что все вышеперечисленные особи во время эксперимента находились в одинаковых условиях; таким образом, их разные фенотипы не могут быть связаны с факторами окружающей среды или питания, но с разными реакциями на один и тот же тип стресса. С другой стороны, в отсутствие этого стресса два (весьма вероятно, разных) генотипа приводят к схожему фенотипу.

Изменения, вызванные охлаждением на уровне шкалы крыла

На оптических микрофотографиях поверхности спинного крыла самцов (рис. 3A) можно заметить, что первые две микрофотографии, соответствующие отсутствию охлаждения или 2 неделям охлаждения, очень похожи по внешнему виду, а покровные чешуи расположены в правильном порядке. ряды разделены рядами андрокониев.Эти результаты снова показывают, что 2 недели охлаждения находятся в пределах «допустимого предела» для этого вида бабочек. С другой стороны, начиная с 4 недель охлаждения, начинает наблюдаться разупорядочение рядов чешуек, где ряды больше не четко очерчены. После 6 недель охлаждения ряды едва различимы, а после 8 или 10 недель охлаждения нельзя наблюдать четких рядов в расположении чешуек (Рис. 3A), на S8 Рис., Разупорядочение гнезд чешуек после 10 показаны недели охлаждения.

Аналогичное наблюдение можно сделать для самок в отношении количества синих чешуек (рис. 3B). У самок ряды чешуек выражены хуже, даже у неохлажденных экземпляров. Доля синих чешуек значительно увеличивается после 8 недель охлаждения (рис. 3B). Дальнейшее наблюдение может быть сделано путем детального сравнения морфологии синих чешуек у самок после 4 или 8 недель охлаждения. Как показано на рис. 4, присутствуют четкие морфологические различия: после 4 недель охлаждения морфология синих чешуек остается относительно неизменной, причем чешуйки имеют зубчатые окончания, похожие на соседние коричневые чешуйки; однако после 8 недель охлаждения синие чешуйки приобретают более удлиненную форму и закругленные концы.Чешуйки спинного покрова диких и неохлаждаемых самок заметно отличаются от чешуек спинного покрова самцов по окраске (самцы: синие, самки: коричневые), микронной морфологии (самцы: чешуйки с закругленной вершиной, самки: чешуйки с закругленной вершиной). зубчатая вершина) и механизм окраски (самцы: структурная окраска, женщины: окраска на основе пигмента). С другой стороны, самцы и самки выражают почти одинаковую генетическую информацию, с той лишь разницей, что пол человека.

Приведенные выше наблюдения составляют основу для формулирования следующей гипотезы: развитие чешуек спинного покрова женского типа регулируется веществом, которое заставляет продуцирующие чешуйку клетки самок экспрессировать гены, отличные от генов, продуцирующих чешуйку клеток самцов. .Продолжительное охлаждение вызывает разложение этого вещества в определенных масштабах. По мере увеличения времени охлаждения разложение происходит во все большем количестве масштабов, и изменения, вызванные процессом разложения, становятся все более выраженными. На первом этапе фотонная наноархитектура, отвечающая за синий цвет, создается внутри корпуса весов без изменения микронной формы шкалы; при более длительном охлаждении изменяется даже микронная морфология чешуек.При одинаковой продолжительности охлаждения основной эффект у самцов — разупорядочение чешуйчатых рядов.

Детальные клеточные механизмы производства фотонных наноархитектур внутри крыловых чешуек [18,19] в настоящее время все еще недостаточно изучены. В нескольких работах производство фотонных наноархитектур гироидного типа связывается с клеточными органеллами на основе мембран [35–37], однако, как показали более старые результаты на основе ПЭМ [38] и более свежие результаты конфокальной микроскопии [20], морфология клеток чешуек крыла является сформированный пучками микротрубочек и филаментами F-актина.Изменения, вызванные изменениями коричневой чешуи самки P . icarus путем длительного охлаждения может обеспечить способ более глубокого понимания явлений, формирующих внутреннюю и внешнюю части весов.

Увеличение беспорядка с увеличением времени охлаждения было несколько неожиданным, потому что, как показано в недавних публикациях по развитию куколки, наблюдаемому под оптическим микроскопом [39], мембрана крыла уже присутствует, когда куколка формируется, и развитие чешуи начинается вскоре после окукливание.Чешуйки производятся специализированными ячейками [21,40] в четко определенном расположении с ячейками розетки. Исследование неохлаждаемых и диких образцов P . icarus также показал, что производящие накипь клетки расположены в правильные ряды, что делает несколько интригующим то, как имеет место разупорядочение, наблюдаемое при времени охлаждения, превышающем 6 недель (S8 Рис.). Возможный механизм может быть связан с процессами клеточного развития, которые происходят в эпителиальных клетках крыльев [21] на стадии куколки.Предыдущая работа показала, что расположение клеток-предшественников чешуек очень похоже на расположение чешуек в крыле взрослых особей [41]. Это наблюдение указывает на изменение процессов, управляющих развитием клеток, в результате длительного охлаждения. Для выяснения этого механизма необходимы дальнейшие исследования.

Приведенные выше наблюдения показывают, что в зависимости от продолжительности охлаждения индуцированные изменения можно разделить на три различных периода: менее 4 недель; От 4 до 8 недель и более 8 недель.Мы вернемся к обсуждению этого вопроса параллельно со статистикой эклозий, приведенной ниже.

Структурные и спектральные изменения фотонных наноархитектур

Как показано на рис. 5, отклонение спектральных положений максимумов синего отражения примерно в три раза больше (35 нм) для женщин, чем для неохлаждаемых мужчин (10 нм), что связано с менее упорядоченным характером фотонного излучения. наноархитектуры, как сообщалось ранее [14]. Отклонение порядка 10 нм, наблюдаемое у мужчин, находится в пределах диапазона вариаций, обнаруженных для данной популяции [25], и имеет меньшую величину, чем различия, обнаруженные между Европой и Азией [42].Более значительный разброс структурной окраски самок может быть связан с переключением, которое происходит, когда клетки чешуи, которые при нормальных условиях дают коричневые чешуйки, вынуждены длительным охлаждением производить чешуйки с совершенно другой внутренней структурой: вместо присутствия чешуек. в основном пустота в своем объеме, они развивают сложную, многослойную наноархитектуру, которая генерирует синий цвет. Размеры такой наноархитектуры очень тесно связаны со спектральным положением максимума отражательной способности.Даже если используется простая многослойная модель [43], изменение пористости или толщины слоя в нанометровом масштабе приводит к смещению спектрального положения максимума отражательной способности. У самцов синий цвет используется для передачи сексуальных сигналов в каждом поколении [23] и поэтому подвергается отбору и имеет узкий диапазон [25]. У самок такой отбор из года в год не происходит, и несколько различных генетических вариаций могут передаваться с равной вероятностью от поколения к поколению.Поэтому, когда охлаждение включает производство фотонной наноархитектуры, создаются менее упорядоченные варианты этой наноархитектуры [14].

Крылья и чешуя двух самцов, показавших наибольшую спектральную разницу после 8 недель охлаждения (самцы № 81 и № 86), были исследованы более подробно. Даже невооруженным глазом можно было заметить некоторые различия в оттенках синей окраски их спинных крыльев, как показано на рис. 7A и 7B. Когда были исследованы отдельные покровные чешуйки, удаленные с этих крыльев (рис. 7C, 7D, 7E и 7F), было обнаружено, что чешуйки самца № 81 имеют немного более темный оттенок и, таким образом, содержат больше пигмента, чем чешуя самца № 86. .Это может быть связано с изменением среднего показателя преломления шкалы. Сравнение спектров отражения отдельных целых крыльев, измеренных либо с интегрирующей сферой, либо при нормальном падении (рис. 8A и 8B), выявило явные различия в цвете крыльев. Спектры были нормализованы к 1 для облегчения сравнения. Помимо сдвига максимума отражательной способности с 388 нм для мужчины № 86 до 416 нм для мужчины № 81, форма спектров также различалась. Эти формы предполагают, что у мужчины № 81, который демонстрирует плечо в сторону более коротких волн, могут присутствовать два немного разных типа наноархитектур — бок о бок — и оба они вносят вклад в общую отражательную способность.Эти различия в наноархитектуре двух самцов подтверждаются усредненными измерениями коэффициента отражения и пропускания, показанными на рис. 8C и 8D, которые были выполнены в отдельных масштабах, показанных на рис. 7. Здесь необходимо учитывать, что измерения, представленные на рис. 8C и 8D были проведены с помощью стандартного оптического микроскопа, который показывает пониженное пропускание в УФ-диапазоне, которое не воспринимается человеческим глазом. Поэтому эти спектры нельзя сравнивать со спектрами, полученными для целых крыльев, но их можно сравнивать друг с другом.Значения отражательной способности более 100% получены потому, что эталоном, относительно которого проводились измерения, было предметное стекло микроскопа, поддерживающее весы.

Изображения

СЭМ и ПЭМ покровных чешуек самца № 81 и № 86 показаны на рис. 9. Можно ясно заметить, что перфорация самца № 81 демонстрирует гораздо большие вариации как по размеру, так и по распределению, в то время как перфорации самца # 86 более регулярны как по размеру, так и по распределению. Статистическая оценка размеров перфораций, видимых на изображениях, полученных с помощью SEM, представлена ​​на рис. 9E и 9F.Можно отметить, что линейный размер перфорации охватываемой детали №81 на 20% превышает размер перфорационных отверстий вилки №86. При расчете площадей необходимо учитывать, что эта линейная разница отображается в квадрате. На рис. 9F нанесены данные отдельных измерений. Можно заметить, что меньшая часть отверстий вилки № 81 попадает в тот же диапазон, что и отверстия вилки № 86, но более значительная часть больше. Это можно воспринимать как две несколько разные фотонные наноархитектуры бок о бок.Необычная форма кривой отражения мужчины № 81, показанная на рис. 8A, может быть объяснена наличием этих двух немного разных наноархитектур рядом. Такие различия в наноархитектуре действительно могут быть причиной наблюдаемых различий в оптических свойствах, как мы показали ранее в случае двух поверхностей крыльев, окрашенных в синий цвет (дорсальная сторона) и золотисто-зеленый (вентральная сторона) для бабочек Albulina Metallica [44] .

Измерение значений толщины слоя на изображениях ПЭМ самцов № 81 и № 86 также указывает на небольшие, но хорошо измеримые различия (таблица S1).Средняя толщина хитиновых слоев на 10% больше для мужчины №81, а воздушные слои, разделяющие слои хитина, на 10% меньше, чем у мужчины №86. Эти результаты очень ясно показывают, что различия в размерах порядка 10 нм оказывают четко наблюдаемое влияние на оптические свойства фотонной наноархитектуры, давая синюю окраску мужского P . икар бабочки.

Доля эклозий и дефектов в зависимости от времени охлаждения

Возвращаясь к эффектам, связанным с продолжительностью охлаждения, следует дополнительно изучить статистические данные об эклозии и дефектной эклозии, показанные на рис.Здесь «клетка» указывает на бабочек, отделяемых от куколок, собранных из клетки, в которой были отложены яйца, а значение «0 недель» использовалось для личинок, которые были выращены в лаборатории после того, как они были собраны из клетки, но были не подвергали охлаждению до того, как им позволили полностью превратиться во взрослую стадию. Фракция шелушения составляла 1 до 4 недель охлаждения, в этот момент наблюдалось резкое падение до 0,4, а затем фракция шелушения 0,93 после 6 недель охлаждения.Как упоминалось выше, куколки, которые охлаждались в течение 4 недель, были помещены в условия низкой освещенности после их извлечения из холодильника, чтобы проверить влияние света на возобновление развития. Результаты ясно показали, что для успешного возобновления куколочного развития необходим достаточно высокий уровень дневного света. Принимая во внимание, что мы пытались собрать свежих куколок до того, как был достигнут порог экдизона [28,45], и что синтез экдистероидов переднегрудной железой был маловероятен в темный период при 5 ° C [46], удвоение Частота неудач шелушения, наблюдаемая у куколок, которым было разрешено возобновить развитие в условиях низкой освещенности, показывает, что для правильного возобновления развития куколки необходим сильный свет.Для бабочки Precis coenia измерение титров экдистероидов показало, что в условиях длинного дня титры экдистероидов начинают расти через 20 часов после окукливания, тогда как в условиях короткого дня титры экдистероидов начинают расти только через 60 часов после окукливания. который наступает намного позже критического для экдистероидов периода и приводит к сезонному цветовому полифенизму [47]. Повышение и снижение уровней экдистероидов вызывают последовательные приступы экспрессии генов [48] и, таким образом, влияют на клеточные процессы.

При времени охлаждения от 4 до 8 недель фракция особей, которые закрылись с дефектами, показывала стабильность, подобную плато, примерно при 0,6. Через 8 недель эта фракция начала резко расти, а через 12 недель бездефектной эклозии не наблюдалось (рис. 10). Существование этого переходного периода соответствовало беспорядку расположения чешуек у самцов (рис. 3А), увеличению количества синих чешуек у самок (рис. 3В) и изменению морфологии синих чешуек у самок (рис. ).

Выводы

Фенотипические изменения, вызванные длительным охлаждением свежеобразованных куколок P . icarus бабочки демонстрируют высокую степень воспроизводимости. Повторяя наши предыдущие эксперименты по охлаждению [14] с более чем 200 куколками, мы обнаружили, что в среднем структурная окраска дорсальной поверхности крыла самцов претерпевала небольшие изменения по сравнению с дикими экземплярами или с бабочками, которые вышли из куколок, которые развились до взрослая стадия в лаборатории и не подвергалась охлаждению.С другой стороны, среднее изменение пигментного рисунка на брюшной поверхности крыла показало изменения, которые были пропорциональны продолжительности охлаждения. Коэффициент пропорциональности был очень близок к найденному в наших предыдущих экспериментах. Однако не все особи, которые охлаждались в течение определенного времени, демонстрировали одинаковую величину изменений в строении их брюшных крыльев. Это открытие может выявить генотипические различия, которые обычно не проявляются в условиях отсутствия стресса.

У обычно коричневых самок появлялось все большее количество синих чешуек по мере увеличения времени охлаждения и проявлялось большее отклонение в спектральном положении синего пика отражательной способности, связанного с синими чешуйками, чем у самцов. Мы связываем это различие с тем, что гены, регулирующие выработку синей наноархитектуры у самок, в отличие от самцов, не подвергаются репродуктивному отбору [25]. Подробное изучение данных микроскопии расположения и морфологии чешуек вместе со статистикой эклозии и доли особей с дефектами подтверждает разделение времени охлаждения на три периода: от 0 до 2 недель, когда вызываются только умеренные изменения. ; От 4 до 8 недель, когда возникают значительные изменения в расположении чешуек и морфологии, но доля изображений с дефектами не превышает 0.6; и от 10 до 12 недель, когда доля эклозии снижается до 0 и очень немногие особи вылупляются без дефектов. Детальный спектральный и структурный анализ чешуек самцов, показывающих наибольшую разницу в структурном цвете после 8 недель охлаждения, показал, что наноархитектура чешуек была изменена у образцов, показывающих наибольшее отклонение от среднего значения для самцов. Наши данные показывают, что отклонения характерных размеров фотонной наноархитектуры порядка 10 нм вызывают легко наблюдаемые изменения оптических свойств фотонной наноархитектуры, ответственные за получение синего цвета мужского P . икар бабочки.

Мы предварительно связываем наблюдаемые изменения синих чешуек у самок с медленным разложением вещества, которое определяет развитие чешуек женского типа во время похолодания. Самцы и самки выражают одну и ту же генетическую информацию, за исключением «модификатора», который учитывает пол человека. На первом этапе, продолжающемся до 6 недель охлаждения, внешняя морфология коричневых покровных чешуек самок не изменяется, но внутри них развиваются наноархитектуры, генерирующие синий цвет.После 8 недель охлаждения, одновременно с увеличением количества синих чешуек, их внешняя морфология изменяется от чешуек с зубчатой ​​вершиной до чешуек с закругленной вершиной (рис. 4), аналогичных по форме синим покровным чешуйкам самцов.

В хорошо спланированном эксперименте по охлаждению, проведенном со свежесформированными куколками P . icarus butterflies, мы смогли повлиять на сложные процессы развития, которые управляют производством сложных наноархитектур внутри чешуек, обладающих структурным цветом и изменениями внешней формы чешуек.

Дополнительная информация

S1 Рис. Линейные аппроксимации всех измеренных количественных аберраций (без усреднения) для двух экспериментов.

F-тест был проведен на исходных данных двух экспериментов и не показал значимых различий (p = 0,0971) между двумя наборами.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0225388.s001

(TIF)

S6 Фиг.

P . icarus куколки, которые не смогли достичь эклозии после возобновления развития после 4 недель охлаждения.

Прозрачный контейнер, в котором куколкам позволяли возобновить развитие после охлаждения, помещали в условия низкой освещенности.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0225388.s006

(TIF)

S8 Рис. Снимки крыльев

P с оптического микроскопа. icarus самцы, у которых были удалены чешуйки крыльев как с дорсальной, так и с вентральной сторон.

Дикие (слева) и 10-недельные охлажденные (справа) образцы показаны в отраженном (верхний ряд) и проходящем (нижний ряд) свете.У дикого экземпляра гнезда чешуек расположены правильными рядами, а у остывшего — неупорядоченное расположение.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0225388.s008

(TIF)

S1 Таблица. Результаты анализа изображений ПЭМ на

P . icarus самцы №81 и №86.

Толщину хитинового и воздушного слоев измеряли на трех изображениях на обоих образцах. Во второй части таблицы показаны среднее значение и стандартное отклонение толщины слоя.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0225388.s009

(DOCX)

Ссылки

  1. 1. Пирих Н., Кунедж Т., Обновленная таксономия и графический сводный инструмент для оптимальной классификации и понимания исследований омики. Оми . А Я . Интегр . Биол . 2018; 22: 337–353.
  2. 2. Хоул Д., Говиндараджу Д. Р., Омхольт С. Феномика: следующий вызов. Нат . Ред. . Генет . 2010; 11: 855–866. pmid: 21085204
  3. 3. Rimm DL, C-path: визит в лабораторию патологии, как у Ватсона. Sci . Перевод . Мед . 2011; 3: 108fs8. pmid: 22072635
  4. 4. Билдер Р.М., Сабб Ф.В., Кэннон ТД, Лондон ЭД, Йенч Д.Д., Паркер Д.С. и др. Феномика: систематическое изучение фенотипов в масштабе всего генома. Neuroscience 2009; 164: 30–42. pmid: 140
  5. 5. Фальгрен Н., Гехан М.А., Бакстер И., Свет, камера, действие: высокопроизводительное фенотипирование растений готово для крупного плана. Курр . Мнение . Завод Биол . 2015; 24: 93–99. pmid: 25733069
  6. 6. Фурбанк Р.Т., Тестер М., Феномика – технологии для устранения узких мест фенотипирования. Тенденции Завод Sci . 2011; 16: 635–644. pmid: 22074787
  7. 7. Джером С., Симпсон Дж. С., Растущие потребности и исчезающий опыт в интегративной биологии насекомых. В: Casa J., Simpson J.S., редакторы. Успехи в физиологии насекомых, их покровах и цвете, Vol.38 Лондон: Academic Press; 2010. С. 1–5.
  8. 8. Ян Ч., Посписилик А. Дж., Полифенизм — окно во взаимодействия генов и окружающей среды и фенотипическая пластичность. Передний . Генет . 2019; 10: 132. pmid: 30863426
  9. 9. Вест-Эберхард MJ, Фенотипическая пластичность и происхождение разнообразия. Анну . Ред. . Эколь . Syst . 1989. 20: 249–278.
  10. 10. ван Берген Э., Осбалдестон Д., Кодандарамайя У., Браттстрём О., Адус-Поку К., Брейкфилд П.М., Консервированные паттерны интегральной пластичности развития в группе полифенических тропических бабочек. BMC Evol . Биол . 2017; 17:59 pmid: 28241743
  11. 11. Nijhout HF, Механизмы контроля полифенического развития у насекомых. Bioscience 1999; 49: 181–192.
  12. 12. Отаки Дж. М., Ямамото Х., Видовые модификации крыльев бабочек. Дев, . Разница в росте . 2004; 46: 1–14. pmid: 15008850
  13. 13. Отаки Дж. М., Физиологически индуцированные изменения окраски крыльев бабочек: механистические и эволюционные последствия. Дж . Физиология насекомых . 2008; 54: 1099–1112. pmid: 18638480
  14. 14. Кертес К., Писстер Г., Хорват З. Э., Балинт З, Биро Л. П., Изменения структурных и пигментных цветов в ответ на холодовой стресс у бабочек Polyommatus icarus . Sci . Репутация . 2017; 7: 1118. pmid: 28442788
  15. 15. Suzuki Y, Nijhout HF, Эволюция полифенизма путем генетической аккомодации. Наука 2006; 311: 650–652. pmid: 16456077
  16. 16.Пааби А.Б., Рокман М.В., Скрытые генетические вариации: скрытый субстрат эволюции. Нат . Ред. . Генет . 2014; 15: 247–258. pmid: 24614309
  17. 17. Биро Л.П., Виньерон Дж.П., Фотонные наноархитектуры у бабочек и жуков: ценные источники для био-вдохновения. Лазерный Фотон . Ред. . 2011; 5: 27–51.
  18. 18. Гираделла Х. Разработка отражающих ультрафиолетовый свет чешуек-бабочек: как сделать интерференционный фильтр. Дж . Морфол . 1974. 142: 395–409. pmid: 30314406
  19. 19. Гираделла Х. Структура чешуек бабочки: узор на кутикуле насекомых. Microsc . Рез. . Техника . 1994; 27: 429–438. pmid: 8018995
  20. 20. Dinwiddie A, Null R, Pizzano M, Chuong L, Leigh Krup A, Ee Tan H и др. Динамика F-актина является прототипом структуры чешуек крыльев бабочки. Дев, . Биол . 2014; 392: 404–418.pmid: 244
  21. 21. Оно Ю., Отаки Дж. М., Получение изображений куколки и личиночных крыльев бабочек в живых клетках in vivo . PLoS One 2015; 10: e0128332. pmid: 26107809
  22. 22. Чжан Л., Мазо-Варгас А., Рид Р. Д., Генетическая основа цвета и радужной оболочки бабочек, Proc . Нат . Acad . Sci . 2017; 114: 10707–10712.
  23. 23. Балинт З., Кертес К., Писстер Дж., Вертеси З., Биро Л. П., Хорошо настроенный блюз: роль структурных цветов как оптических сигналов в распознавании видов местной фауны бабочек (Lepidoptera: Lycaenidae: Polyommatinae). Дж . Р . Соц . Интерфейс 2012; 9: 1745–1756. pmid: 22319114
  24. 24. Левонтин Р. Генетическая основа эволюционных изменений. Нью-Йорк: издательство Колумбийского университета; 1974.
  25. 25. Пистер Г., Кертес К., Балинт З., Биро Л. П., Изменчивость структурной окраски у двух видов бабочек с различными стратегиями презиготного спаривания. PLoS One 2016; 11: e0165857. pmid: 27832120
  26. 26. Давидовиц Г., Рофф Д., Нийхаут Х. Ф., Синергизм и антагонизм ближайших механизмов позволяют и ограничивают реакцию на одновременный отбор по размеру тела и времени развития: эмпирический тест с использованием экспериментальной эволюции. Am . Нат . 2016; 188: 499–520. pmid: 27788344
  27. 27. Веб-сайт продукта BioPhot Analyzer 2.0 [цитировано 30 сентября 2019 г.]. В: Сайт SoftAdmin [Интернет]. https://softadmin.ro/biophot/index.php
  28. 28. Кертес К., Пистер Дж., Якаб Э., Балинт З., Вертези З., Биро Л. П., Зависимость от температуры и насыщения при зондировании паров чешуей крыльев бабочки. Мат . Sci . Анг . C 2014; 39: 221–226.
  29. 29. Nijhout HF, Молекулярные и физиологические основы формирования цветового рисунка. В: Casa J., Simpson J.S., редакторы. Успехи в физиологии насекомых, их покровах и цвете, Vol. 38 с. 249. Лондон: Academic Press; 2010.
  30. 30. Симпсон С.Дж., Меч Г.А., Ло Н., Полифенизм у насекомых. Курр . Биол . 2011; 21: R738 – R749. pmid: 214
  31. 31. Nijhout HF, Развитие и эволюция адаптивных полифенизмов. Evol . Дев, . 2003; 5: 9–18. pmid: 124
  32. 32. Nijhout HF, Механизмы контроля полифенического развития у насекомых. Bioscience 1999; 49: 181–192.
  33. 33. Бриссон Дж. А., Дэвис Г. К., Правильные инструменты для работы: регулирование развития полифенической морфы у насекомых. Курр . Мнение . Наука о насекомых . 2016; 13: 1–6. pmid: 266
  34. 34. Nygren GH, Bergström A, Nylin S, Широтные клины размера тела у бабочки Polyommatus icarus формируются за счет взаимодействия генов с окружающей средой. Дж . Наука о насекомых . 2008; 8: 1–13.
  35. 35. Михильсен К., Ставенга Д.Г. Гироидные кутикулярные структуры в чешуях крыльев бабочки: биологические фотонные кристаллы. Дж . Р . Соц . Интерфейс 2008; 5: 85–94. pmid: 17567555
  36. 36. Саранатан В., Осуджи CO, Мочри С.Дж., Но Х., Нараянан С., Сэнди А. и др. Структура, функционирование и самосборка фотонных кристаллов одиночного сетевого гироида (I4 1 32) в чешуях крыла бабочки. Протокол . Нац. . Acad . Sci . USA 2010; 107: 11676–11681. pmid: 20547870
  37. 37. Уилтс Б.Д., Зубири Б.А., Клатт М.А., Бутц Б., Фишер М.Г., Келли С.Т. и др. Гироидные наноструктуры бабочек как замороженный взгляд на развитие внутриклеточной мембраны. Sci. Adv. 2017; 4: e1603119.
  38. 38. Гринштейн М.Э., Ультраструктура развивающихся крыльев гигантского шелкопряда, Hyalophora cecropia . II.Чешуйчатые и раструбообразующие клетки. Дж . Морфол . 1972; 136: 23–51. pmid: 5009131
  39. 39. Ивата М., Оно Й., Отаки Дж. М., in vivo в реальном времени. Визуализация развития крыла бабочки: выявление клеточной динамики ткани куколочного крыла. PLoS ONE , 2014; 9: e89500. pmid: 24586829
  40. 40. Гринштейн М.Э., Ультраструктура развивающихся крыльев гигантского шелкопряда, Hyalophora cecropia . II. Чешуйчатые и раструбообразующие клетки. Дж . Морфол . 1972; 136: 23–51. pmid: 5009131
  41. 41. Ёсида А., Аоки К., Схема расположения чешуек крыла чешуекрылых. 1. Периодический клеточный паттерн в куколочном крыле Pieris rapae . Дев, . Разница в росте . 1989; 31: 601–609.
  42. 42. Кертес К., Писстер Г., Балинт З., Биро Л.П., Биогеографические закономерности в структурном синем цвете бабочек мужского пола Polyommatus icarus . Sci . Rep ., 2019; 9: 2338. pmid: 30787341
  43. 43. Wilts BD, Leertouwer HL, Stavenga DG, Визуализирующая рефлектометрия и микроспектрофотометрия чешуек крыльев ликаенид бабочки с перфорированными многослойными слоями. Дж . Р . Соц . Интерфейс . 2009; 6 Приложение 2: S185 – S192.
  44. 44. Кертес К., Мольнар Г., Вертези З., Коос А.А., Хорват З.Э., Марк Г.И. и др. Материалы фотонной запрещенной зоны в масштабе бабочки: возможный источник «чертежей». Мат . Sci . Анг . B 2008; 149: 259–265.
  45. 45. Suszczynska A, Kaniewska MM, Bebas P, Giebultowicz JM, Kotwica-Rolinska J, Циркадная регуляция питания и роста гусениц. Дж . Физика насекомых . 2017; 101: 113–122.
  46. 46. Steel CGH, Vafopoulou X, Циркадная оркестровка гормонов развития у насекомых, Rhodnius prolixus . Сравн. . Биохим . Physiol ., Part A Mol . Интегр . Физиол . 2006. 144: 351–364.
  47. 47. Rountree DB, Nijhout HF, Гормональный контроль сезонного полифенизма в Precis coenia (Lepidoptera: Nymphalidae). Журнал физиологии насекомых , 1995; 41: 987–992.
  48. 48. Zitnan D, Adams ME, Нейроэндокринная регуляция шелушения. В: Гилбер Л. И. Редактор. Эндокринология насекомых , стр. 253–309. Лондон: Academic Press; 2012 г.

Дорогостоящие укрытия для листьев защищают куколок моли от паразитоидов

  • Abarca M, Boege K (2011) Затраты и преимущества строительства укрытий и выкапывания траншей для гусениц пиралид. Ecol Entomol 36: 564–573

    Статья Google Scholar

  • Brault S (1991) Выбор хозяина и определение пола потомства у одиночной паразитической осы. Behav Ecol Sociobiol 29: 353–360

    Статья Google Scholar

  • Cerda O, Hinojosa IA, Thiel M (2010) Поведение амфипода при строительстве укрытия Peramphithoe femorata (Kroyer) на водорослях Macrocystis pyrifera (Linnaeus) C.Агард из северно-центральной части Чили. Biol Bull 218: 248–258

    PubMed Google Scholar

  • Danks HV (2002) Модификация неблагоприятных условий насекомыми. Oikos 99: 10–24

    Статья Google Scholar

  • De Moraes CM, Lewis WJ, Paré PW, Alborn HT, Tumlinson JH (1998) Растения, зараженные травоядными животными, избирательно привлекают паразитоидов. Nature 393: 570–573

    Статья Google Scholar

  • Diniz IR, Hay JD, Rico-Gray V, Greeney HF, Morais HC (2012) Гусеницы, строящие укрытия в серрадо: сезонные колебания в относительной численности, паразитизм и влияние нектарников вне цветков.Arthropod Plant Interact 6: 583–589

    Статья Google Scholar

  • Fukui A (2001) Непрямые взаимодействия, опосредованные укрытиями для листьев в сообществах животных и растений. Popul Ecol 43: 31–40

    Статья Google Scholar

  • Джентри Г.Л., Дайер Л.А. (2002) Об условной природе неотропической защиты гусениц от их естественных врагов. Экология 83: 3108–3119

    Статья Google Scholar

  • Годфрей HCJ (1994) Паразитоиды.Princeton University Press, Нью-Джерси

    Google Scholar

  • Greeney HF, Walla TR, Lynch RL (2010) Архитектурные изменения в укрытиях из личиночных листьев Noctuana haematospila (Lepidoptera: Hesperiidae) между видами растений-хозяев с разной толщиной листьев. Зоология 27: 65–69

    Статья Google Scholar

  • Гриней Х.Ф., Дайер Л.А., Смиланич А.М. (2012) Кормление личинками чешуекрылых опасно: обзор химической, физиологической, морфологической и поведенческой защиты гусениц от естественных врагов.Инвертировать Surv J 9: 7–34

    Google Scholar

  • Hagen SB, Sorlibraten O, Ims RA, Yoccoz NG (2006) Зависимый от плотности меланизм у личинок зимней моли (Lepidoptera: Geometridae): мера против паразитоидов? Environ Entomol 35: 1249–1253

    Статья Google Scholar

  • Hawkins BA (1994) Паттерн и процесс во взаимодействиях паразитоид-хозяин. Издательство Кембриджского университета, Кембридж

    Книга Google Scholar

  • Hawkins BA, Cornell HV, Hochberg ME (1997) Хищники, паразитоиды и патогены как агенты смертности в популяциях насекомых-фитофагов.Экология 78: 2145–2152

    Статья Google Scholar

  • Хохберг М.Э., Хокинс Б.А. (1992) Убежища как предиктор разнообразия паразитоидов. Наука 255: 973–976

    PubMed Статья CAS Google Scholar

  • Джервис М.А., Кидд НАК (1986) Стратегии кормления хозяев у перепончатокрылых паразитоидов. Biol Rev 61: 395–434

    Статья Google Scholar

  • Jones MT, Castellanos I, Weiss MR (2002) Всегда ли укрытия для листьев защищают гусениц от беспозвоночных хищников? Ecol Entomol 27: 753–757

    Статья Google Scholar

  • Lill JT, Marquis RJ (2003) Экосистемная инженерия гусеницами увеличивает разнообразие насекомых-травоядных на белом дубе.Экология 84: 682–690

    Статья Google Scholar

  • Лилл Дж. Т., Маркиз Р. Дж. (2007) Манипуляции с микропредприятиями: инженерия экосистемы насекомыми, строящими укрытия. В: Cuddington K, Byers JE, Wilson WG, Hastings A (eds) Экосистемные инженеры. Academic Press, London, pp. 107–138.

    Chapter Google Scholar

  • Лилл Дж. Т., Маркиз Р. Дж., Уокер М. А., Петерсон Л. (2007) Экологические последствия совместного использования укрытий гусеницами, связывающими листья.Entomol Exp Appl 124: 45–53

    Статья Google Scholar

  • Loeffler CC (1994) Естественная история листо-складчатых гусениц, Dichomeris spp. (Gelechiidae), на золотарниках и астрах. J N Y Entomol Soc 102: 405–428

    Google Scholar

  • Loeffler CC (1996a) Складывание листьев гусеницы как защита от хищничества и вытеснения: постановочные встречи с личинками Dichomeris (Gelechiidae) на золотарниках.J Lepid Soc 50: 245–260

    Google Scholar

  • Loeffler CC (1996b) Адаптивные компромиссы складывания листьев у гусениц Dichomeris на золотарниках. Ecol Entomol 21: 34–40

    Статья Google Scholar

  • Martinsen GD, Floate KD, Waltz AM, Wimp GM, Whitham TG (2000) Положительные взаимодействия между листоедами и другими членистоногими увеличивают биоразнообразие гибридных тополей.Oecologia 123: 82–89

    Статья Google Scholar

  • Morse DH (2009) Четырехуровневые взаимодействия: использование травоядными папоротников и последующее действие паразитоидов и гиперпаразитоидов. Ecol Entomol 34: 246–253

    Статья Google Scholar

  • Morse DH (2011) Размер и время развития травоядных хозяев и паразитоидов на отдаленно родственных пищевых растениях. Am Midl Nat 166: 252–265

    Статья Google Scholar

  • Накамура М., Огуши Т. (2003) Положительные и отрицательные эффекты укрытий из листьев на травоядных насекомых: соединение нескольких видов травоядных на иве.Oecologia 136: 445–449

    PubMed Статья Google Scholar

  • Ruehlmann TE, Matthews RW, Matthews JR (1988) Роли структурного и временного изменения укрытия личинками чешуекрылых, питающихся папоротником. Oecologia 75: 228–232

    Статья Google Scholar

  • Sagers CL (1992) Манипуляции с качеством растения-хозяина: травоядные животные держат листья в темноте. Funct Ecol 6: 741–743

    Статья Google Scholar

  • Шотт Т., Хаген С.Б., Имс РА, Йоккоз Н.Г. (2010) Прекращаются ли вспышки популяций в субарктических регионах личиночными паразитоидами? J Anim Ecol 79: 701–708

    PubMed Статья Google Scholar

  • Smith HD (1932) Phaeogenes nigridens Wesmael, важный паразитоид ихневмонид европейского кукурузного мотылька.Вашингтон, округ Колумбия, Министерство сельского хозяйства США, Технический бюллетень USDA 331, 46pp

  • Sokal RR, Rohlf FJ (1969) Биометрия.

  • Leave a Reply